引言食管癌(esophagus cancer)是指从下咽到食管胃结合部之间原发于食管黏膜上皮的恶性肿瘤。世界范围内食管癌的发病率在所有恶性肿瘤中位居第八,但在癌症病例死亡原因中是第6个常见的原因,这表明食管癌不仅是常见的恶性,而且还对人类造成了极大的健康危害。中国是食管癌是高发区,食管癌死亡人数占癌症死亡人数的21.8%,全国排第二。由于早期诊断困难,导致多数患者在就诊时已属临床中晚期,预后不佳。不断深入探讨食管癌的发病及预后,将有助于提高食管癌的诊断和治疗。磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)信号传导途径,与人类多种肿瘤的发展密切相关。根据PI3K的结构、底物、活化机制、分布和功能可分为三类:I,II,III3种亚型。根据偶联受体不同类型I型PI3K进一步分为:IA型和IB型,前者耦合酪氨酸激酶生长因子受体,其结合G蛋白偶联受体。II型是含有一个p110状的催化亚基。III型存在于酵母中,是由Vps34蛋白(磷酸肌醇3-激酶空泡蛋白质分类34)组成的。PI3K是一种酶,多种生长因子可激活PI3K,活化的PI3K在质膜上磷酸化其底物3,4二磷酸磷脂酰肌醇(phosphatidylinositol 3,4-trisphosphate,PIP2)使其转化为第二信使3,4,5三磷酸磷脂酰肌醇(phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate,PIP3)。研究表明,PI3K信号通路在促进细胞增殖,抑制细胞凋亡,促进肿瘤血管生成和肿瘤细胞迁移和侵袭具有重要作用。LRIG1(Ieucine-rich repeats and immunoglobulin-like domains-1,LRIG1)即亮氨酸重复序列和免疫球蛋白样域-1,LRIG1实质是一种跨膜糖蛋白。LRIGs是新近发现的一类基因,研究人员发现,该家族包括三个成员分别是:LRIGl,LRIG2,LRIG3。其中LRIG1是Nilsson等在人类基因组中找到的与果蝇Kekkon-1基因同源的一类基因,该基因位于人染色体3pl4.3位点,生物学行为可能是生长因子的负性调控,此外还维持上皮干细胞稳定性。lrig1基因编码一种富含亮氨酸的重复序列和免疫球蛋白样多肽,包括三部分结果:1、细胞外基质:主要由含15富含亮氨酸的重复单元(lrr)和三个免疫球蛋白样结构域(ig)的组乘的信号肽。2、跨膜段;3、胞内尾部,能抑制受体酪氨酸激酶的负反馈。lrig1广泛存与人体各个组织并且各组织含量不同。hedman等已发现,lrig1产物在脑、心脏、肾脏、骨骼肌、胃及睾丸等组织内含量较高;最高表达者为脑部,最低为脾脏,两者相差240倍。2002年,nilsson和hedman等通过rt-pcr和western-blot(western印迹技术)的方法分析了在多种上皮源肿瘤细胞中lriglmrna和蛋白的表达,发现lrigi的表达水平在肿瘤组织中缺失或明显降低。通过本实验也将进一步研究并证实lrig1可能是一种抑癌基因。目的检测pi3k和lrig1在食管鳞癌组织及正常食管组织中的表达情况,分析放化疗的治疗方式对于非手术食管鳞癌患者的疗效。方法56例食管癌组织标本均本来自安徽省皖北煤电集团总医院放疗科在2008年5月至2010年5月期间完成放化疗或放疗的病人。采用免疫组化的方法检测56例食管癌组织及20例正常食管组织中pi3k和lrig1基因的表达,并结合临床病理特征分析56例肿瘤组织中的pi3k和lrig1表达与临床病例特征的关系。同步放疗组31例,单纯放疗组25例,接受同步放化疗的患者其中化疗药物为fp(氟尿嘧啶1000mg/m2/d1~d5+顺铂40mg/m2/d1~d3)或tp(紫杉醇135~175mg/m2/d1+顺铂40mg/m2/d1~d3)方案,3~4周重复。入组56例食管鳞癌均行放射治疗,因适形放疗计划等待时间长而先常规放疗,后适形放疗11例。采用6mv-x线直线加速器1.8~2.0gy/次,1次/d,5次/周。常规放疗剂量dt34~38gy;适形放疗剂量dt20~66gy,中位剂量64gy。比较pi3k和lrig1表达阳性组与pi3k和lrig1表达阴性组的近期和远期疗效,探讨pi3k和lrig1表达情况与食管鳞癌放化疗敏感性的关系及预后。采用spss20.0统计学软件,kaplan-meier检验法应用于单因素分析,两组间的生存率曲线比较的假设检验使用log-rank法,cox比例风险回归模型应用于多因素分析。p<0.05差异有统计学意义。结果pi3k蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达率为78.6%(44/56),在正常食管组织的阳性表达率为15.0%(3/20),差异具有统计学意义(P<0.05)。LRIG1蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达率为58.9%(33/56),在正常食管组织的阳性表达率为95.0%(19/20),差异具有统计学意义(P<0.05)。PI3K阳性率在TNM分期(III、IV期)、淋巴结转移阳性及远处转移阳性的表达率高于TNM分期(I、II期)、淋巴结转移阴性及远处转移阴性组(P值均<0.05);LRIG1蛋白表达在性别、年龄、肿瘤部位、细胞分化程度、TNM分期、淋巴结转移、远处转移、治疗方法方面,阳性率未显示有统计学差异。放疗组中完全缓解的有5例,部分缓解的有10例,稳定或疾病进展的患者有8例,治疗有效率为65.2%;放化疗组中完全缓解的有11例,部分缓解的有18例,稳定或疾病进展有4例,治疗有效率为87.8%(χ2=4.134,P=0.042),两组间差异有统计学意义。放疗+化疗组的3年生存率为48.5%,单纯放疗组的3年生存率为43.5%,比较两组患者总的生存率,得出两组间差异无统计学意义,P=0.677。结论在食管鳞癌组织中PI3K蛋白表达高于正常食管组织,差异有统计学意义(P<0.05),提示其过度表达可能与食管癌的发生有关。同时,相关分析结果显示,PI3K蛋白表达与TNM分期、有无淋巴结转移及有无远处转移有关,提示PI3K与食管癌的形成有关。食管癌组织中LRIG1蛋白的阳性表达显著低于正常食管组织中LRIG1蛋白阳性的表达,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。本实验结果还表明LRIG1蛋白表达在性别、年龄、肿瘤部位、细胞分化程度、TNM分期、淋巴结转移、远处转移、治疗方法等方面,阳性率未显示有统计学差异。本研究结果显示PI3K与LRIG1在食管鳞癌中的表达呈负相关,有统计学意义(P<0.05)。PI3K阳性组的近期有效率(72.7%)要低于PI3K阴性组(100.0%),就近期疗效而言阴性组占优势,3年生存率没有显示出预后不同(P=0.147)。LRIG1阳性组的近期有效率(87.9%)要高于LRIG1阴性组(65.2%),就近期疗效而言阳性组占优势,3年生存率没有显示出预后不同(P=0.706)。