论文部分内容阅读
去泛素化酶(Deubiquitinating enzymes, DUBs)是一类具有逆转泛素化作用的蛋白酶。近年来研究发现,去泛素化酶不仅在细胞的正常生理活动中发挥重要作用,而且可能与肿瘤的发生、发展有密切关系。卵巢肿瘤相关蛋白酶1(OTU domain-containing ubiquitin aldehyde-binding protein1, OTU1)是去泛素化酶家族成员之一,在肿瘤中具体作用及其作用机制还未明确。因此我们通过探讨OTU1在结肠癌发生、发展中的作用,从而进一步了解OTU1与人类肿瘤的关系。应用实时定量PCR(Real-time PCR)和免疫组织化学技术,在mRNA和蛋白水平上检测了OTU1在结肠癌组织中的表达情况。应用质粒载体经脂质体转染建立OTU1过表达细胞株,并应用慢病毒载体系统建立了OTU1干扰细胞株；利用CCK-8实验分析了OTU1过表达或干扰对结肠癌细胞生长的影响；Transwell和Matrigel胶穿实验分析了其对结肠癌细胞迁移和侵袭的影响。研究结果显示：结肠癌组织中OTU1mRNA的表达量较其配对癌旁高3.5倍,差异具有统计学意义(P<0.05)。免疫组织化学结果显示OTU1蛋白在结肠癌组织中的高表达率明显高于其相应的癌旁正常粘膜组织,差异具有统计学意义(x2=4.09,P<0.05)；其在结肠癌中的表达水平与患者的年龄、性别、有无远处转移、Duke’s分期之间的差异无统计学意义(P>0.05)；与肿瘤大小(P<0.01)、肿瘤分期(P<0.01)、淋巴结转移(P<0.01)密切相关,差异具有明显的统计学意义;OTU1蛋白在癌旁正常粘膜-腺瘤-结肠癌中的表达呈递增趋势,高表达率分别为：11.11%、55.56%和77.78%,差异具有统计学意义(P<0.05)。OTU1过表达能够促进结肠癌细胞在体外的生长,促进结肠癌细胞的迁移和侵袭能力。反之,OTU1表达受干扰后,结肠癌细胞在体外的生长被抑制,迁移和侵袭能力减弱。结论：OTU1的mRNA和蛋白水平均在结肠癌组织中高表达。OTU1蛋白具有促进了结肠癌细胞的生长、迁移和侵袭能力。OTU1在结肠癌的发生、发展和转移中发挥着重要的作用。