孕妇外周血胎儿有核红细胞的富集、识别和分离

来源 :安徽医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ytm_2009
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目的利用抗转铁蛋白受体(CD71)抗体和抗白细胞共同抗原(CD45)抗体双标法检测不同孕周孕妇外周血中有核红细胞的比例以期选择最佳孕周进行胎儿有核红细胞富集。方法利用抗CD71抗体和抗CD45抗体双标法采用流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测81例不同孕周孕妇外周血中有核红细胞的比例,并与未孕组和脐血组进行对照。结果孕7~34周孕妇外周血中CD71+/CD45dim细胞的比例为(0.107±0.063)×10-2,与未孕组和脐血组相比差异均有统计学意义;CD71+/CD45dim细胞在外周血中的比例在孕17~18周达峰值,为(0.144±0.096)×10-2。结论不同孕周孕妇外周血有核红细胞比例不同,孕17~18周比例最高。利用母血循环中的胎儿有核红细胞进行产前诊断的最佳时间可选择在妊娠17~18周。目的利用流式细胞术富集孕妇外周血胎儿有核红细胞(fetal nucleated red blood cells, FNRBCs),识别孕妇外周血ε-血红蛋白链(epsilon- haemoglobin- chain,Hbε)阳性有核红细胞(NRBCs)以期进行非侵入性产前诊断,并寻找最佳检测孕周。方法运用密度梯度法提取有核细胞层、利用CD71抗体染色通过流式细胞术对10~25孕周孕妇外周血FNRBCs进行富集,然后利用Hbε抗体染色进行荧光显微镜下的Hbε阳性NRBCs的识别。结果在14例10~15孕周孕妇外周血中识别出Hbε阳性NRBCs13例,阳性率为92.86%,阳性标本中每10ml母血中平均有6.92±2.75个Hbε阳性NRBCs。在12例16~25孕周孕妇外周血中识别出Hbε阳性NRBCs 9例,阳性率为75.00%,阳性标本中每10ml母血中平均2.67±1.32个Hbε阳性NRBCs。结论利用流式细胞术富集孕妇外周血FNRBCs后利用Hbε抗体可识别出Hbε阳性NRBCs,应用Hbε抗体识别FNRBCs最佳时期可选择在10~15孕周。
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