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目的：构建RPL8原核表达载体,经诱导表达后获得一定纯度的RPL8蛋白；冲击致敏DC,观察其在体外对CTL的增殖和活化效果；免疫治疗荷瘤小鼠后,观察小鼠的存活期及肿瘤体积变化。方法：1.PCR扩增目的基因pUC57-RPL8,双酶切后与载体pET28a (+)连接、构建pET28a (+)-RPL8重组质粒,经双酶切及测序鉴定后,转化入大肠杆菌BL21诱导表达,经SDS-PAGE和Western Blotting鉴定。2.无菌分离小鼠骨髓细胞,在细胞因子rm-CSF、rmIL-4、LPS联合诱导下,体外培养DC,每天在显微镜下观察DC形态特征,LPS诱导前后用流式细胞仪检测其DC的表面标志。3.RPL8蛋白与DC混合培养,24h后加入FITC-羊抗鼠抗体,1h后在荧光倒置显微镜下观察。4.RPL8冲击树突状细胞后与尼龙毛柱分离的小鼠脾脏T淋巴细胞,按不同比例混匀,72h后分别以不同效靶比加入到Bl6黑色素瘤细胞中继续培养48h后,酶标仪测其OD值。5.将RPL8蛋白冲击的DC疫苗注入荷瘤小鼠体内,观察肿瘤的体积变化及小鼠的生存时间与瘤体组织的病理变化。结果：1.构建的pET28a (+)-RPL8重组质粒酶切鉴定及测序结果正确；经SDS-PAGE电泳和Western Blotting分析可见约28KDa大小蛋白。2.倒置显微镜下观察DC具有典型的树突状结构,流式细胞仪检测CDllc、CD80、MHC-I类及MHC-II类分别为77.3%、76.1%、62.2%和74.4%；荧光倒置显微镜下观察DC内有绿色荧光。3.RPL8蛋白冲击DC组可刺激T细胞增殖和活化能力,其诱导的CTL对小鼠黑色素瘤细胞有特异性杀伤作用。4.RPL8蛋白冲击的DC疫苗,注入荷瘤小鼠体内后,小鼠生存期明显延长,能抑制肿瘤生长,肿瘤体积大小明显小于DC及PBS组。结论：成功制备DC疫苗,该疫苗对黑色素瘤有生长抑制作用,为免疫治疗黑色素瘤提供理论依据。