第一部分　　 背景：地塞米松是糖皮质激素类药物，常被用来促进间充质干细胞的成骨、成脂、成软骨分化。最近，地塞米松也应用于间充质干细胞的体外扩增培养，尤其是骨髓来源的间充质干细胞。而且，亦有研究显示地塞米松能减少细胞的凋亡。因此，需要系统地研究地塞米松对间充质干细胞基本细胞生物学的影响。另外，虽然很多实验数据都证明间充质干细胞对某些疾病的有效性，但是间充质干细胞的生物安全性也需要明确。所以，本实验也初步探讨了脐带来源的间充质干细胞的生物安全性。　　 目的：由于具有独特的器官修复功能和免疫调节功能，MSC广泛应用于各种疾病的治疗研究。但是MSC在体外不容易扩增，常常需要添加地塞米松来促进细胞的增殖。因此，需要系统地研究和比较地塞米松对MSC的基本细胞生物学特性的影响。另外，也需要初步探讨MSC的安全性。　　 方法：从人脐带中获取MSC，并对MSC做出鉴定，包括流式细胞仪检测细胞表型和分化。然后经过不同浓度的地塞米松培养2周后，收获MSC细胞，进行流式细胞仪检测细胞表型、促增殖实验、免疫调节实验、检测分泌因子等等。在生物安全性方面，我们检测了MSC的TP53基因序列、端粒酶反转录酶表达测定、细胞核型分析、长期毒性实验和致瘤性实验。　　 结果：我们的实验结果显示不同浓度的地塞米松对MSC的作用有差异性。在促增殖和影响凋亡上，高低两种浓度的地塞米松对MSC的作用刚好出现相反的效果。然而，不管浓度高低，地塞米松都能损坏MSC的免疫调节能力。高浓度的地塞米松还明显抑制了MSC分泌HGF。而低浓度的地塞米松则促进了VEGF的分泌。生物细胞安全性方面的实验没发现MSC有毒性及致瘤性。　　 结论：低剂量的地塞米松能促进MSC的体外扩增，并增强MSC的抗凋亡能力。但是由于地塞米松能损坏MSC的免疫调节能力，因此，要利用MSC的免疫调节功能来治疗疾病，则不合适在MSC的培养过程中添加地塞米松。低浓度的地塞米松能促进MSC高分泌VEGF，这有利于提高MSC治疗促进血管新生类疾病。而且，我们的数据也证明了MSC使用的安全性。　　 第二部分　　 背景：肝纤维化(liver fibrosis，LF)是所有慢性肝病的共同病理基础，由肝脏细胞外基质(extracellular matrix，ECM)的过度沉积所致。伴随着纤维胶原的增多，疤痕组织和增生性结节代替正常组织，此时进展为肝硬化，导致正常肝功能的衰竭。各种原因引起的肝脏炎症，或损伤后组织修复过程的代偿反应，均可导致肝纤维化的发生。目前认为纤维化阶段的肝脏病变是可逆的，但若没有得到及时有效的治疗，则最终往往导致肝腹水、上消化道出血、肝硬化、肝癌、肝功能衰竭等一系列疾病，是引起人类死亡的主要原因之一。间充质干细胞能分泌多种细胞因子，能促进器官特异性祖细胞的增殖和分化；MSC亦具有能分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、心肌细胞、肝细胞等潜能，参与受损组织的再生修复。由此可见，探索研究MSC治疗肝纤维化及其作用机制，具有重大意义。　　 目的：基于MSC的再生修复实质器官和免疫调节的双重作用，本项研究旨在研究脐带MSC抗纤维化机制，期望开发出一种新型的有效的治疗肝纤维化的细胞制剂，为UC-MSC在人肝纤维化及肝硬化的临床应用提供理论依据和实验基础。　　 方法：腹腔注射橄榄油稀释的四氯化碳诱导肝纤维化模型，每3天注射一次，共注射30次。在体内趋化研究实验中，在造模成功后，将体外CM-DiI荧光标记的人脐带MSC通过尾静脉注射移植到体内。24小时后，取肝脏做冰冻切片，免疫荧光显微镜检测CM-DiI荧光强度，并和健康对照组比较。治疗组，造模结束后，每周给1次MSC细胞治疗，治疗3周和6周。取肝脏做HE染色和Masson染色，评价肝细胞和胶原纤维的变化。同时，我们还评价了UC-MSC在体外向肝细胞诱导分化的情况。　　 结果：UC-MSC分泌高浓度的HGF和MMPs。UC-MSC移植治疗肝纤维化模型小鼠后，HE染色和Masson染色均提示，UC-MSC能明显促进胶原纤维的消退和肝细胞再生，使得硬化的肝脏基质得到正常重建。此外，UC-MSC能在体外能够分化成为肝细胞，同时具有部分肝细胞和MSC的功能。　　 结论：人UC-MSC可以有效地逆转肝纤维化的发展，并起到良好的抗纤维化治疗作用；其作用机制可能与分泌丰富的HGF和MMPs有关。　　 第三部分　　 背景：急性肝功能衰竭是在原有肝病的基础上，肝功能的严重损伤或者肝细胞的广泛性坏死引起的。目前整个肝脏移植治疗是最好的治疗方法，但是整个肝移植也面临着一系列问题，肝源不足就是一个瓶颈难题。肝细胞移植治疗曾经是一个治疗手段。然而肝细胞移植的技术难题依然存在，比如肝细胞在体外难于增殖扩增，异体肝细胞引起的免疫排斥反应等等，均限制了临床的应用。因为探索研究MSC治疗急性肝衰竭，其意义重大。　　 目的：基于MSC的再生修复实质器官和免疫调节的双重作用，本项研究旨在研究脐带MSC治疗急性肝功能衰竭，期望开发出一种新型的有效的治疗急性肝衰竭的细胞制剂，为UC-MSC在人急性肝衰竭的临床应用提供理论依据和实验基础。　　 方法：联合应用D-氨基半乳糖和脂多糖腹腔注射，诱导小鼠发生急性肝衰竭，观察在造模后出现死亡的时间和生存率。在造模后，给与MSC移植治疗，并观察不同时间点和不同剂量对急性肝衰竭小鼠的生存率的影响。　　 结果：D-氨基半乳糖和脂多糖联合应用能成功诱导小鼠急性肝衰竭，大概在造模后8-10小时内，大部分小鼠开始出现死亡。MSC的治疗能提高造模小鼠的生存率，但疗效和治疗时间密切相关。　　 结论：人UC-MSCs可以有效地治疗急性肝衰竭小鼠，挽救了小鼠由于急性肝衰引起的死亡;其作用机制可能与分泌丰富的HGF和抗炎因子有关。