论文部分内容阅读
目的:多囊卵巢综合征（PCOS）是导致不孕的常见病因,临床特征具有很强的异质性,雄激素增多和胰岛素抵抗是PCOS的共同病理生理基础,并多伴随肥胖、脂肪因子水平异常和糖脂代谢紊乱,且甲状腺功能异常的发病率增高。体外受精/卵胞浆内单精子注射（IVF/ICSI）助孕治疗后,PCOS患者仍存在不良的妊娠结局。脂肪酸及其代谢产物如花生四烯酸（AA）和前列腺素（PGs）参与了生殖的多个过程,但其在卵巢局部的代谢变化对生殖功能的影响知之甚少。我们拟通过本研究为探索PCOS患者代谢和生殖功能异常的机制奠定一定的基础:⑴分析PCOS患者雄激素增多与胰岛素抵抗的相互作用,亚临床甲状腺功能减退对脂代谢紊乱的影响;⑵探索脂肪因子chemerin在PCOS患者血清和卵泡液中的变化及与卵巢形态和卵母细胞发育的关系;⑶剖析IVF/ICSI助孕的PCOS患者卵泡液脂肪酸代谢变化对卵母细胞发育潜能的影响;⑷通过构建动物模型,探讨多囊卵巢大鼠chemerin和AA代谢变化的机制。方法:⑴根据2003年鹿特丹PCOS诊断标准,于我院内分泌科收集PCOS患者428例;根据血清chemerin三分位数水平进行分组（G1-G3）;⑵另于我院生殖中心收集拟行IVF/ICSI治疗的PCOS患者33例和对照组29例,测定卵泡液chemerin,计算优胚率等胚胎实验室参数;⑶GC/LC-MS方法检测卵泡液游离脂肪酸及其代谢物水平;⑷联合高脂喂养和丙酸睾酮注射（HF+T）构建多囊卵巢（PCO）大鼠模型,检测大鼠chemerin和脂肪酸谱,分析卵巢组织chemerin、胞浆型磷脂酶A2（cPLA2）、环氧化酶（COXs）在基因和蛋白水平的表达情况。结果:⑴随着游离睾酮指数（FAI）的升高,总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白（LDLc）和HOMA-IR逐渐增高,高密度脂蛋白则逐渐降低（p<0.05）。校正血脂后,Logistic回归分析提示HOMA-IR与FAI独立相关（非肥胖组:OR 1.302,95%CI 1.061-1.765;肥胖组:OR 1.132,95%CI 1.008-1.270）。ROC曲线分析发现,当促甲状腺素（TSH）>4.07mIU/L时,发生高LDLc血症的风险增加。⑵PCOS组血清和卵泡液chemerin水平均显著高于对照组（P<0.05）;以G1组为参考,G2组和G3组发生卵巢体积增大的OR值增高（G2组:OR=1.602,95%CI:1.170-2.194;G3组:OR=1.857,95%CI:1.335-2.583）;PCOS组卵泡液chemerin与优胚率负相关（P=0.039）。⑶PCOS组卵泡液中亚油酸和PGs水平高于对照组;亚油酸和AA与获卵数正相关,亚油酸还与MII期卵母细胞数和受精数负相关;PGE2和PGF2α与MII期卵母细胞数、受精数正相关（P<0.05）。多元回归分析显示15d-PGJ2是优胚率的独立影响因子（β=0.225,P=0.021）;⑷HF+T组大鼠血清chemerin较对照组升高,内脏、皮下脂肪及卵巢chemerin和受体CMKLR1的mRNA表达水平均显著高于对照组（P<0.05）。与对照组比较,HF+T组大鼠血清AA浓度升高,卵巢AA浓度降低;HF+T组大鼠卵巢组织磷酸化cPLA2的表达降低,COX2 mRNA和蛋白表达水平升高（P<0.05）。结论:⑴雄激素增多尤其是FAI增高是PCOS患者胰岛素抵抗和脂代谢紊乱加剧的重要因素;当TSH大于4.07mIU/L时,PCOS患者发生高LDLc血症的风险增加。⑵PCOS患者血清和卵泡液chemerin水平升高,chemerin与卵巢多囊风险增加和胚胎质量不佳有关。⑶PCOS患者卵泡液AA浓度与对照组相当,但其经COX途径的代谢产物明显增高;游离脂肪酸及其代谢产物对卵母细胞发育潜能的影响因其种类和卵母细胞所处的发育阶段不同而有所差异。⑷PCO大鼠chemerin在脂肪组织中的高表达可解释其血清水平的变化,cPLA2活性下降和COX2表达升高是PCO大鼠卵巢组织AA下降的主要原因。