一种新型染料脱色过氧化物酶的鉴定及表征

来源 :大连理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:annybill1984
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
染料脱色过氧化物酶(dye-decolorizing peroxidase)是含有血红素,能降解各种有毒染料的一类蛋白,并且可以参与菌体氧化应激调节,提高菌体对氧化压力的抗性。  运动发酵单胞菌Zymomonas mobilis ZM4(ATCC31821)中有一种假定过氧化物酶基因,它编码的蛋白(称为ZmDyP)包含与其他染料脱色过氧化物酶共同保守的氨基酸D149,R239,T254,F256和GXXDG结构基序,说明ZmDyP是染料脱色过氧化物酶家族的一个新成员。但目前没有其酶学性质及功能等相关报道。  本研究以Z mobilis ZM4基因组DNA为模板,通过PCR扩增目的基因,克隆到大肠杆菌表达载体pET-21b(+)中。构建成功的质粒pET-21b-ZmDyP转化到Escherichiacoli BL21(DE3)/pLysS中,经IPTG诱导表达后,通过金属螯合层析纯化ZmDyP。SDS-PAGE分析,纯酶的分子量为36 kDa,而活性染色显示分子量为108kDa,表明这个酶在活性状态下可能是一个三聚体。光谱扫描显示ZmDyP有一个典型的血红素吸收峰,说明它是含有血红素的蛋白。对ZmDyP酶学性质进行了研究,发现以2,2-二氨-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)ABTS为底物,ZmDyP表现出更高的转化效率。意想不到的是,在有高浓度异戊醇的环境中,不需要H2O2,ZmDyP与底物反应的活性会增强,这项特性在其它染料脱色过氧化物酶或血红素过氧化物酶中还没有研究过,因此这将是血红素过氧化物酶研究的一个新方向。  此外,对ZmDyP的生理功能进行了探索,发现它很可能通过提高对氧化压力的抗性,赋予宿主菌的生长优势。这些研究结果丰富了染料脱色过氧化物酶家族信息,并且为ZmDyP的进一步研究和潜在的生物技术应用奠定了基础。
其他文献
  应变局部化剪切带的研究是国际岩土工程界关注的热点之一。对应变局部化剪切带的启动机制进行理论分析,随着硬(软)化模量从正值变为负值,变形模式由原先的均匀变形转变为不
  "动静叠加原理"是采掘空间周围煤岩体中的静载荷与矿震形成的动载荷叠加,超过了煤岩体冲击的最小载荷而发生的冲击矿压灾害。本文以某煤矿某一工作面为研究对象,通过有限
会议
作为作曲家复杂精神劳动产物的音乐,是作曲家灵魂的触动之声。在当今社会环境下,这一灵魂之声也随着社会而演变,其时代性与多元化趋势逐步凸显。采用传统与现代技法相结合的
  承压水上采煤常常面临工作面底板突水的危险,而工作面底板暴露空间长度(采空区底板长度)和承压水压力则是影响承压水上回采工作面底板破断突水的主要因素。为有效控制工作
会议
氨是由氢气和氮气在高温高压、催化剂的情况下合成制得,氢气和氮气都来源于原料气。原料气的制备主要从固体燃料(煤炭)、液体燃料(石油)、和气体燃料(天然气)中制取。我国目前能源
  针对中煤平朔集团有限公司采场、选煤厂的煤堆的特点,针对牵引式滑坡的特点,运用极限平衡法进行分级逐次计算,分析不同高度煤堆在堆脚处开挖后的滑落规律及其稳定性。对比不
  按照底板比压测试方法,对矸石墙的承载力进行现场测试,得到其承载性能及应变硬化特性,并根据沿空留巷顶板运动规律,建立了力学结构模型,揭示矸石墙受力与顶板冒落高度之间关系
常规粳稻秀水09经过甲基磺酸乙酯(EMS)诱变处理,获得了一个矮秆窄叶突变体dnl1((d)warf and(n)arrow(l)eaf1)。本文对dnl1突变体进行了相关表型分析、突变性状的遗传分析和基因
分级微纳米结构氧化铝粉体因为微观上保持了纳米材料的特性,宏观上克服了纳米材料的缺点而广泛应用于吸附和催化等领域。本论文采用水热法和液相沉淀法分别制备了团簇状、六方柱状以及珊瑚状等系列分级微纳米结构氧化铝粉体,并研究了其在吸附领域的应用。主要研究结果如下:1.以AlCl_3·6H_2O为铝源、CH_3COOK为沉淀剂、聚苯乙烯磺酸钠(PSS)为结构调节剂,采用温和的水热-焙烧法成功地制备了系列对CO
本文通过对荣华二采区10
期刊