正常大鼠坐骨神经和不等径小间隙套接神经再生的形态学研究

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目的:通过正常大鼠坐骨神经主要节段横断面、纵切面神经纤维分布及细胞大小及细胞密度研究,分析大鼠坐骨神经神经纤维在主要神经段不同平面(横向、纵向)形态学分布规律;通过不等径小间隙套接神经再生的形态学研究,观察神经吻合口神经再生形态和再生部位的神经纤维分布。为周围神经损伤后再生及神经功能放大的研究提供形态学依据。方法:取成年健康Wistar大鼠30只,自上而下沿脊背及左侧、右侧下肢后部依次切开皮肤及肌肉,显露坐骨神经及各分支。共60条坐骨神经,体式显微镜标尺测量坐骨结节,大腿中1/3,大腿下1/3水平坐骨神经横径及前后径,并以测量部位为中心上下切取坐骨神经长约0.5 cm,防止坐骨神经损坏、变形并保持其完整,将坐骨神经固定在大鼠肝脏上,置于Leica-3000冰冻切片机进行横断面、纵切面的显微解剖,连续切片。经脱水、透明、HE染色,Olympus显微镜下观察并照相。另在梨状肌出口处取坐骨神经0.5cm,以置于Leica-3000冰冻切片机进行纵切面的显微解剖,连续切片。经脱水、透明、HE染色,Olympus显微镜下观察并照相,体式显微镜标尺测量细胞大小,细胞板计算出细胞密度。取成年健康雄性Wistar大鼠36只,采用同种异体大鼠的腹腔动脉作为桥接物,向近侧行干支分离后,切除近段腓总神经1cm,其近侧断端翻转并缝合于临近的肌肉组织。神经的断端之间留有3mm的间隙,将保留的近端神经与远端的正常直径的坐骨神经以10-0显微缝线小间隙套接缝合,制造神经再生室,观察不等径小间隙套接在术后7d,14d,21d,28d,42d,8w,16w的不同时间点的神经再生形态。结果:①从近端到远端横断面的神经,整体形状为椭圆,神经分布是均匀的。神经主干于大腿上1/3开始分支,分出二到三个肌支,于大腿下1/3分为胫神经和腓总神经,神经横断面布满Schwann细胞,平均大小6.25μm×4.75μm,细胞密度是23.15个/mm2。②不等径小间隙套接神经再生在术后7d套接动脉全长可见5-6层弹力纤维,无扭曲及狭窄,再生室内充满外渗的血浆和组织液,有大量细胞核,再生室内未见连续性再生的神经纤维。术后14d,小间隙内均质状物减少,再生室内细胞成分仍较多。小间隙可见少量的不连续的神经纤维,未达远侧神经断端,动脉套内细小血管增生明显。未见神经纤维溢出至再生室外。术后21d,神经纤维在管腔内连续通过,神经纤维走行多数较平直,仅缝接区可见轻度扭曲,再生室内细胞成分仍较多,较14d时减少。术后28d,缝接点神经连接完好,远端神经纤维较前增粗,但仍然较近端细,再生室远侧神经纤维数量,密度与近侧相比,明显增多,套接血管无塌陷,包绕于神经外。术后42d,再生神经纤维增粗,多数排列较平直,神经纤维间及神经外套管内大量血管增生。术后8w,近端每根细小神经轴突数量增多,并与远端多根神经对接而再生。术后16w,远端神经纤维直径与近端无明显差异,远端神经纤维数明显多于近端。再生纤维胞核数量较多,套管结构完整。结论:①坐骨神经平坐骨结节处没有分支,神经主干于大腿上1/3分出二到三个肌支,于大腿下1/3分为胫神经和腓总神经,为周围神经损伤动物模型的建立提供了显微解剖学依据。②大鼠坐骨神经横断面及纵切面神经的分布及细胞大小、密度的研究,为周围神经损伤动物模型提供形态学依据。③坐骨神经不等径小间隙套接神经再生的形态学研究,胫神经能够再生出多根轴突,并能够与远端坐骨神经形成良好的对接,神经具有功能储备,表现为神经再生的放大效应。
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