【摘 要】
:
肥胖状态下脂肪组织内的脂肪细胞过度增殖和分化,诱导巨噬细胞浸润增多,炎症因子不断增加,从而引发慢性炎症。研究表明许多基因和micro RNAs参与了该过程的调控,但目前对于肥胖诱导的脂肪组织慢性炎症发生的具体机制仍不完全清楚。本研究将构建的FSTL1过表达载体pc DNA3.1-FSTL1及人工合成的si RNAs转染小鼠皮下前脂肪细胞,通过油红O染色检测脂滴聚集情况和甘油三酯含量,并结合q PC
【基金项目】
:
国家自然科学基金(U19A2036,31530073和31772576);
论文部分内容阅读
肥胖状态下脂肪组织内的脂肪细胞过度增殖和分化,诱导巨噬细胞浸润增多,炎症因子不断增加,从而引发慢性炎症。研究表明许多基因和micro RNAs参与了该过程的调控,但目前对于肥胖诱导的脂肪组织慢性炎症发生的具体机制仍不完全清楚。本研究将构建的FSTL1过表达载体pc DNA3.1-FSTL1及人工合成的si RNAs转染小鼠皮下前脂肪细胞,通过油红O染色检测脂滴聚集情况和甘油三酯含量,并结合q PCR和Western blotting技术检测成脂分化相关基因和炎症基因的mRNA和蛋白表达水平的变化。通过软件预测及双荧光素酶报告系统检测靶向FSTL1的miRNA,并通过向小鼠皮下前脂肪细胞内转染miRNA Mimic和Inhibitor进一步探究miRNA与FSTL1调控脂肪分化和炎症的具体作用机制。此外,通过建立小鼠皮下前脂肪细胞与骨髓来源巨噬细胞的直接共培养体系,以期深入探究脂肪分化与炎症发生的相互关系,为治疗肥胖等代谢性疾病及改善动物生产性能奠定一定理论基础。本研究主要结果如下:(1)成功分离培养了小鼠皮下前脂肪细胞,油红O染色显示脂滴聚集明显,细胞分化能力较强。(2)过表达FSTL1显著抑制脂滴生成,小鼠皮下前脂肪细胞中脂肪分化关键基因PPARγ、FABP4的mRNA表达水平和FABP4的蛋白水平显著下降(P<0.05,P<0.01),但炎症基因IL-1β、CCL2的mRNA表达水平和IL-1β的蛋白水平显著上升(P<0.05,P<0.01);反之,通过si RNAs抑制FSTL1的表达,则会促进小鼠皮下前脂肪细胞分化,抑制炎症因子的表达。(3)软件预测和双荧光素酶报告系统结果显示,miR-125a-3p可以靶向作用于FSTL1并显著下调其相对荧光素酶活性(P<0.01);过表达miR-125a-3p显著抑制FSTL1基因的mRNA和蛋白表达水平,而抑制miR-125a-3p的表达则明显上调FSTL1的mRNA和蛋白表达水平(P<0.01)。(4)通过向小鼠皮下前脂肪细胞内转染miR-125a-3p Mimic和Inhibitor,发现过表达miR-125a-3p促进脂肪分化基因PPARγ、FABP4的mRNA以及FABP4蛋白的表达(P<0.05,P<0.01),而炎症基因IL-1β、CCL2的mRNA和IL-1β的蛋白水平呈现显著下调(P<0.01);相反,抑制miR-125a-3p的表达则阻碍成脂分化过程,促进炎症基因的表达。(5)成功建立了小鼠皮下前脂肪细胞和骨髓来源巨噬细胞的直接共培养体系;共培养条件下,分化的小鼠皮下前脂肪细胞可诱导骨髓来源巨噬细胞炎性因子IL-1β和i NOS的mRNA表达量极显著增加(P<0.01);反之,骨髓来源巨噬细胞吞噬成脂分化过程产生的脂滴,降低PPARγ和LPL的mRNA表达水平(P<0.01),抑制分化过程。综上,本研究证实了miR-125a-3p可以靶向FSTL1基因促进小鼠皮下前脂肪细胞分化并抑制炎症发生。
其他文献
互联网经济的发展离不开推荐系统的支撑,随着我国大数据的产业链越来越完善,推荐系统也开始为用户创造出更多的应用价值,围绕着用户数据开辟出的巨大市场,推荐系统在金融、教育、娱乐等诸多行业领域有着举足轻重的影响。推荐系统的应用使得电影网站能为用户提供更加便捷智能的交互方式,能提高网站用户的活跃度。为了进一步完善传统推荐算法的不足,也为了能让商家更加快捷地为目标用户推送商品广告,本文设计并实现一个电影智能
随着视频监控系统在人们日常生活各场景的全面性部署,通过计算机视觉技术分析视频监控数据的智能监控系统越来越广泛地应用于交通违章、人员聚集区域防控等方面,为基层安全监管执法提质增效,节约人力成本。目标跟踪是智能视频监控系统的一个重要环节,它将连续的视频帧中同一目标对象关联起来,获取目标在监控视频中的运动轨迹,为目标运动的分析提供基础依据。视频监控数据为实时视频流,对目标跟踪算法处理速率有较高要求,通过
随着互联网的飞速发展,网络购物已经成为主流,但是带来足不出户便利的同时也带来了很多问题,比如如何买到物有所值的商品、如何买到高评价的商品。通常用户使用商品的评分系统来判断商品的优劣,但是由于“网络水军”行业的兴起,用户很难从中发现有用的信息,无法准确的对商品优劣进行判断,同时由于每个人对于商品的评分标准不尽相同,这就容易造成较大的误差,进而影响用户的判断。所以可以根据商品评论进行分析,优化用户的购
当下疫情防控进入常态化时期,旅游业也从2020年初的低谷时期渐渐复苏。民宿作为一种深受年轻人喜欢的旅游住宿选择,在2020年初一度面临大量房源停止营业、经营惨淡的情况,而现在,民宿业也正逐步恢复到疫情前的水平。民宿平台作为一个中介平台,将提供民宿房源的经营者和旅游出行者连接在一起,并为计划住宿的潜在消费者提供了大量的信息数据。这些数据中,有很大一部分是民宿消费者在平台上对自己住宿时的体验和感想进行
柑橘全爪螨(Panonychus citri)是一种世界性分布的经济害螨,目前对其防治手段仍以化学防治为主。乙唑螨腈是沈阳中化农药化工研发有限公司开发的一种新型商业化的杀螨剂,具有优异的杀螨活性。本文以柑橘全爪螨室内敏感品系为对象,研究了乙唑螨腈对柑橘全爪螨的亚致死效应和多种酶活的影响,研究结果如下:1、用不同的方法测定了乙唑螨腈对各螨态的室内毒力。试验结果表明,用乙唑螨腈处理柑橘全爪螨24 h后
近年来我国经济的迅猛发展带来了一系列环境问题,雾霾天气在我国许多城市中时有发生,严重威胁了空气质量和居民健康。雾霾的主要组成成分之一是细颗粒物(PM2.5),而PM2.5污染会对人体的呼吸系统造成极为严重的伤害,从而降低人类的寿命。同时PM2.5污染能直接或间接的影响气候变换,改变人类的生存环境。因此,如何建立一套科学的PM2.5污染智能预警系统,实现对PM2.5进行精准预测,进而实现公共居民环境
衰老是有机体生理完整性逐渐消失的过程,是细胞、组织和器官随年龄增长而发生不可避免的自然退化的结果。目前已发现多种因素能延缓模式生物的衰老,包括遗传因素(基因和信号通路)和环境因素(药物干预和饮食限制等)。二氢杨梅素(Dihydromyricetin,DHM)是一种黄酮类化合物。研究表明,二氢杨梅素具有多种有益于健康的作用,包括抗氧化、抗炎、抗癌、抗微生物等等。因此,二氢杨梅素可能是一种可以用作衰老
本试验以水稻品种荃优华占、油菜品种川油36号为材料,设计了5种稻油轮作技术模式进行单因素随机区组试验。于2017年10月~2019年10月在广汉进行了2年的定位试验,研究了不同稻油轮作耕种模式的土壤培肥、水稻和油菜生长、干物质积累与分配、产量及其构成因素、温室气体排放和经济效益的效果。研究结果如下:1.在土壤培肥方面,不同稻油轮作模式对0-20cm耕层土壤容重和土壤孔隙度作用最明显,其中,优化模式
卵母细胞超低温冷冻保存作为重要的生殖辅助技术,在社会多个领域具有非常重要的应用价值。然而,超低温冷冻可引起卵母细胞质量下降,进而导致其胚胎发育潜能下降,甚至胎儿发育异常。因此,改善冻融卵母细胞的发育潜力非常迫切。褪黑素可促进小鼠冻融卵母细胞的体外发育,但其主要作用于卵母细胞后期发育过程中的哪个阶段仍不清楚。因此,本试验旨在研究褪黑素(melatonin,MT)对冻融小鼠成熟(metaphaseⅡ,
国家监察体制改革是法治反腐、公权治理的中国式改革方案,亦是重塑党和国家监察体系、优化腐败治理能力的重大政治体制改革。该项改革的实施是在党的全面引领下,统筹既有监察资源、新设监察规范、创新合署模式、贯通纪法衔接、畅通职权协作的系统化法治工程。从专责反腐的监察机构到独立运行的监察职权,再至实现监察效能的调查职权,权力运行呈现出从法理证成至具体行权的逻辑进路,关注监察调查职权规范现状,方可实现权力运行观