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目的:研究沉默DJ-1对DADS抑制MGC803细胞增殖与迁移侵袭的影响。证实DJ-1是DADS抑制人胃癌细胞迁移与侵袭的作用靶点之一。方法:构建DJ-1沉默质粒,转染MGC803细胞,建立稳定DJ-1沉默MGC803细胞系。DADS处理MGC803细胞、空载体组细胞以及DJ-1沉默MGC803细胞后,采用MTT、平板克隆形成实验、划痕实验与Transwell侵袭实验、裸鼠成瘤实验检测DADS与DJ-1沉默对MGC803细胞增殖、迁移侵袭及裸鼠成瘤能力的影响。细胞免疫荧光、q RT-PCR、Western Blot检测DADS处理前后MGC803细胞DJ-1的表达。Western Blot检测DADS与DJ-1沉默对MGC803细胞PTEN、Akt、p-Akt表达的改变。结果:1.成功构建稳定DJ-1沉默MGC803细胞。将DJ-1干扰质粒及阴性对照质粒分别转染MGC803细胞,通过Western Blot、q RT-PCR验证质粒A对DJ-1的干扰效果最明显,转染后用Puromycin筛选,建立稳定DJ-1沉默MGC803细胞系。2.DJ-1沉默与DADS对MGC803细胞增殖与迁移侵袭能力的影响。MTT和平板克隆实验结果表明,DJ-1沉默与DADS均能抑制MGC803细胞的增殖能力,并且DJ-1沉默可增强DADS对MGC803细胞增殖抑制的作用。划痕实验与Transwell侵袭实验结果显示,DJ-1沉默和DADS处理后MGC803细胞的迁移与侵袭能力减弱(P<0.05),并且DJ-1沉默可增强DADS抑制肿瘤迁移与侵袭的能力。3.DADS处理前后各组MGC803细胞DJ-1表达的改变。细胞免疫荧光、q RT-PCR、Western Blot实验结果显示,DJ-1主要分布在细胞浆中,DADS处理各组MGC803细胞后较未处理组DJ-1、p-Akt表达明显减少,PTEN的表达增加(P<0.05)。4.DJ-1沉默与DADS对MGC803细胞裸鼠成瘤能力的影响裸鼠成瘤实验表明,DJ-1沉默和DADS能明显抑制MGC803细胞裸鼠体内成瘤能力。免疫组化结果显示,DJ-1沉默和DADS处理后,移植瘤组织中DJ-1阳性表达较对照组明显减少,而PTEN的表达较对照组明显增加。另外,DJ-1沉默及DADS处理后与对照组比较,移植瘤组织中Ki-67、CD-34、Vimentin阳性表达下降,而E-cadherin明显增强。结论:1.DADS可下调DJ-1通过PTEN/Akt通路抑制MGC803细胞增殖与迁移侵袭。2.DJ-1沉默可抑制MGC803细胞的增殖与迁移侵袭,增强DADS对MGC803细胞的增殖与迁移侵袭的抑制作用。3.DADS与沉默DJ-1均可抑制人胃癌MGC803细胞的成瘤能力,并且两者具有协同作用。