猪被认为是流感病毒的“中间宿主”和“混合器”，可同时感染禽流感病毒和人流感病毒，并可以通过在猪体内的重组产生具有流行潜能的新毒株。对猪流感的监测是流感流行病学研究中的一项重要内容。本研究对2003～2004年分离自山东和河南两省不同猪场的12株猪H9N2亚型流感病毒的抗原性和遗传特性进行了分析。抗原性分析结果表明，5株山东分离株HA的抗原性不同于以往所分离到的禽H9N2亚型流感病毒，说明发生了较大的变异，而7株河南分离株的抗原性未发生明显改变。HA裂解位点分析揭示，山东猪H9N2亚型流感病毒的HA裂解位点均为-R-L-S-R-，不同于已在我国禽群中流行的Dk/HK/Y280/97亚系病毒，而河南分离株HA裂解位点则与Dk/HK/Y280/97亚系病毒一致，均为-R-S-S-R-。进化树分析显示，山东分离株的HA和NA基因形成了一个可能来源于早期H9N2亚型禽流感病毒的新的亚系，即SD/03-like亚系：而且山东分离株部分内部基因与H5亚型病毒高度同源，证明这些病毒可能是H9和3H5两个亚型病毒的重排病毒；而河南分离株的所有基因都与禽源H9N2亚型流感病毒亲缘关系较近。 流感病毒的宿主特异性是由HA与细胞上末端链接有糖基的唾液酸受体介导的。为了确定几株猪H9N2亚型流感病毒分离株的受体结合特性，本研究在国内首次建立一种类似间接ELISA的固相酶联试验，即利用“病毒-受体-酶”三者之间耦联的方法证实了猪H9N2亚型流感病毒Sw/SD/FJN/03仍然保持了禽源流感病毒的受体结合特性，即具有与SA α 2，3Gal受体结合的能力，而Sw/SD/FNY/03和Sw/HN/2/04同时具有与SA α 2，3Gal和ISA α 2，6Gal两种受体结合的能力。受体结合试验表明，H9N2禽流感病毒传播给猪后，有可能导致病毒受体结合特性的改变。 为了阐明猪源H9N2病毒感染哺乳动物后，TLR7在宿主抗病毒感染中的变化情况与作用，本研究利用实时荧光定量PCR技术检测了攻毒后不同时间内小鼠肺组织中TLR7基因mRNA表达的变化。结果发现，在感染流感病毒后的第1～3天，肺组织中T127含量明显高于对照组(P<0.05)，并伴随着肺组织内巨噬细胞的增加。随后TLR7表达量开始下调，攻毒后第5、7、14天与对照组相比，均不显著；至第14天，攻毒组小鼠的肺脏已无明显病理改变。该结果提示TLR7可能在介导宿主抗感染先天性免疫中发挥作用。 通过以上研究结果表明，H9N2亚型流感病毒在禽和猪之间的种间传播增加了产生具有新的抗原性和遗传特性毒株的可能性，并有可能导致禽流感病毒感染猪后发生受体结合特性的改变。因此，加强猪流感流行病学和分子流行病学的调查与研究，对掌握流感病毒遗传变异规律和防制动物及人间禽流感都具有重要的意义。