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梭梭(Haloxylon ammodendron(C.A.Mey) Bunge)是西北沙漠地区极为抗旱、耐盐的超旱生植物,在生态建设方面具有重要作用。通过研究其抗逆机理、挖掘其特有优良性状及相关基因,采用常规育种与基因工程相结合方法,将优良抗性基因直接用于农作物和林木的遗传改良,能够在较短时间内培育出抗逆性更强的植物,可以在一定程度上缓解或解决日益恶化的生态环境。本研究通过模拟自然干旱,首次运用cDNA-AFLP图谱技术研究梭梭干旱诱导相关基因的表达,所获基因与拟南芥等模式植物基因比较后,对部分调控类和衰老相关基因在PEG、脱水和外源ABA作用下的表达情况进行了比较详细的研究。主要结果如下: (1)运用cDNA-AFLP指纹图谱技术对干旱胁迫25天和正常浇水梭梭幼苗进行差异显示分析,共获得86个差异表达基因,有55个基因能够找到高度同源的序列。其中,48个基因与已知或假定功能基因具有较高同源性,包括信号传导、转录调控、转录因子、防卫相关、衰老相关、转运体蛋白、细胞壁合成、生长发育、光合作用等方面,占所得基因总数的56%,这些基因可能在植物抗逆胁迫中发挥重要作用。这也说明梭梭遭遇干旱胁迫时,具有与其它植物类似的抗逆境胁迫代谢途径。 (2)在所获的48个已知或假定功能基因中,调控类基因有16个,占已知功能基因的33%。这说明梭梭在干旱胁迫发生时,会及时启动相应的调控机制,从而快速适应干旱胁迫等逆境条件,这可能是其适应沙漠环境的重要机制之一。 (3)干旱胁迫25d时梭梭幼苗与对照相比高生长降低31.6%,基部向上木质化高度则增加34.7%,ABA含量增加141.9%,Fv/Fm却没有明显变化。并且,与胡杨相比较,离体叶片能够在较长时间内保持较高持水能力,这表明梭梭抵抗干旱胁迫的能力很强。这些生理水平上的变化可能与此时梭梭衰老相关基因PHB和CYP、细胞壁合成相关基因以及转运体蛋白基因表达增强有关。 (4)与拟南芥、水稻、杨树基因组数据库序列进行比较表明,本文所得到的梭梭相关基因与双子叶植物拟南芥和杨树同源基因数目较多,而与单子叶植物水稻同源基因数目相对较少。通过Genevestigator对其中51个已知基因与已有拟南芥基因芯片杂交信息对比,结果显示在处于同类胁迫时,所选基因中,梭梭中高水平表达的基因在拟南芥中仅有部分高表达,这可能是梭梭能够在干旱沙漠环境中生存的机制之一。 (5)对CIPK23、bZIP、ABC、AAT、PHB、SAG、CYP、RbcS和CAB基因在PEG渗透胁迫和脱水胁迫条件下表达谱的研究表明,梭梭幼苗遭遇PEG和脱水胁迫时,