真核生物基因的转录往往受到多种转录因子的协同调控,称之为组合调控。核转录因子Y(Nuclear Factor Y,NF-Y)是组合调控机制的一个典型例子,由三个不同的亚基组成:NF-YA、NF-YB和NF-YC。只有三个亚基相互结合形成异源三聚复合物后才能特异识别某些基因启动子区的CCAAT框,进而促进或抑制这些基因的转录。最近有研究发现拟南芥的NF-YB、NF-YC能与转录因子家族CONSTANS-Like(COL)中的成员CO和COL15相互作用。由于COL还未发现DNA结合域,因此找到与之相互作用的含DNA结合域的转录因子意义重大。拟南芥的COL分为三大类:GroupⅠ、GroupⅡ和GroupⅢ,其中GroupⅠ又分为GroupⅠa和GroupⅠc两小类,CO和COL15分别属于GroupⅠ a和GroupⅡ。迄今为止,还未发现NF-Y与GroupⅠ C和GroupⅢ的COL相互作用。　　 为了筛选出与GroupⅠC和GroupⅢ的COL相互作用的NF-Y,我们开展了以下研究并取得了一些创新性的结果:　　 (1)将GroupⅠ C中的COL3以及GroupⅢ的所有成员COL6、7、8、16的CCTdomain克隆到含DNA结合域(binding domain,BD)的酵母表达载体pDEST32上,并将所有的NF-YB、NF-YC的全长蛋白克隆到含转录激活域(activation domain,AD)的酵母表达载体pDEST22上,通过酵母双杂交(yeast two-hybrid,YTH)试验首次发现了COL3的CCT domain与NFY-B4、NF-YC2、9有弱相互作用,与NF-YC1、4、5有强相互作用。　　 (2)将COL3的CCT domain克隆到双分子荧光互补(bimolecular fluorescencecomplementation,BiFC)表达载体pCCFP-GW上,将NF-YB4、NF-YC1、2、4、5、9克隆到BiFC表达载体pNYFP-GW上,共转化洋葱表皮细胞,均在细胞核内观察到明亮的绿色荧光,说明COL3与NF-YB4、NF-YC1、2、4、5、9在细胞核中直接相互作用。　　 (3)对COL3的CCT domain与NF-YA1的同源区域的三级结构进行了预测,结果发现它们呈现高度的相似性,均形成无规卷曲-α螺旋-无规卷曲的三级结构,说明COL3可能以与NF-YA相似的方式与NF-YB、NF-YC相互作用。　　 COL3与NF-YB、NF-YC相互作用不仅扩展了先前的关于COL和NF-Y家族相互作用的发现,而且为进一步了解COL3和NF-Y的生化活性以及它们的功能打下了基础。