背景支气管肺癌绝大部分来源于各级支气管上皮,正确命名应为支气管癌,简称肺癌,为最常见的肺部原发性恶性肿瘤。世界范围内的发病率和病死率都在急剧上升。在多数发达国家中占男性常见恶性肿瘤的首位。自1987年以来,美国女性死于肺癌的人数已超过乳腺癌,也已占常见肿瘤的首位。目前肺癌的治疗尚缺乏理想的有效手段。近些年来,随着生物技术的进步,免疫治疗再次成为热点。对肿瘤免疫逃逸机理的研究有助于人们寻找和设计新的肿瘤免疫治疗方法和途径。有研究证实机体对肿瘤的免疫应答反应处于低能状态,从而使肿瘤逃避机体免疫监视,这在肿瘤的发生、发展中起到重要作用。越来越多的研究证明,肿瘤细胞表达的人类白细胞抗原-G(HumanLeukocyte Antigen G,HLA-G)主要通过抑制机体免疫活性细胞的作用而在肿瘤免疫逃逸中发挥作用。HLA-G与一些免疫相关的细胞因子的相互作用及它对肺癌发生、发展过程的影响目前仍不清楚。为此我们设计了本实验,以期明确HLA-G参与肺肿瘤免疫逃逸的机制,为完善肺癌的免疫治疗提供理论依据。目的本研究拟探讨肺癌患者肿瘤组织HLA-G的表达和外周血淋巴细胞亚群、血清IL-10、IFN-γ的变化,以进一步阐明HLA-G表达与肺癌患者临床特征的关系,肺癌患者机体免疫状况的变化,以及这一过程中IL-10、IFN-γ的改变与HLA-G表达的相互影响。方法1、收集肺癌和对照组患者的肺组织及血液标本。2、小部分新鲜组织标本匀浆后提取RNA,用RT-PCR方法检测HLA-G基因相对表达浓度。其他组织标本固定后制作石蜡切片,常规染色确定肿瘤病理分型及分化程度;免疫组化SP法检测组织标本HLA-G抗原表达程度。3、用流式细胞分析技术(FCM)检测外周血淋巴细胞亚群相对计数,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测外周血血清中IL-10和IFN-γ的浓度。结果1、从新鲜肺组织中提取的总RNA经RT—PCR反应后,HLA-G引物的扩增产物肺癌组的阳性表达为51.5%,对照组中表达为0,两者之间比较有显著差异(P＜0.01)。肺癌患者HLA-GmRNA阳性表达在不同性别、不同年龄、不同病理分型之间的差异不明显(P＞0.05),但在不同临床分期及分化程度之间有差异(P＜0.01)。2、HLA-G蛋白在肺癌组病理组织的阳性反应物主要定位于细胞膜,呈棕黄色,阳性表达率45.4%,对照组组织中表达为0,两者之间比较有显著差异(P＜0.01)。肺癌患者HLA-G蛋白阳性表达在不同性别、不同年龄之间的差异不明显(P＞0.35),但在不同病理分型、分化程度及临床分期之间有差异(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01)。3、外周血淋巴细胞亚群相对计数中的T淋巴细胞(CD3~+/CD45~+)、NK细胞(CD16~+CD56~+/CD45~+)比率显示:肺癌组较对照组降低(P＜0.01),但在肺癌组织HLA-G蛋白表达阳性与阴性组织之间差异不明显(P＞0.05)。4、外周血血清中IL-10的含量在肺癌组较对照组明显升高(P＜0.01),在肺癌组织HLA-G蛋白表达阳性的患者高于HLA-G蛋白表达阴性患者,外周血血清中IFN-γ的含量在肺癌组较对照组降低(P＜0.05),在HLA-G蛋白表达阳性与阴性组织之间差异不明显(P＞0.05)。结论HLA-G在肺癌组织中表达较对照组明显上调。HLA-G表达与肺癌患者年龄、性别没有关系。肿瘤病理类型对HLA-GmRNA表达基本没有影响,但肺腺癌组织表达HLA-G抗原较其他类型肺肿瘤明显增多。HLA-G表达随分化程度的降低及临床分期的进展而增加。肺癌患者的免疫状况是降低的,IL-10的升高与肺癌组织HLA-G抗原表达的上调同时存在,具有一致性,而未发现IFN-γ对HLA-G表达的影响。综合上述情况,在肺癌发生、发展的过程中HLA-G可能参与了对肺癌肿瘤细胞周围微环境的改造。HLA-G可作为判断肺肿瘤进展及的重要指标之一,亦可能成为肺癌免疫治疗的新靶点。