【摘 要】
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卵巢癌是严重威胁妇女生命的恶性肿瘤,长期以来,尽管各种诊断与治疗方法不断完善和提高,使患者预后有所改善,但五年生存率仍较低,徘徊在25%～30%左右。由于多数卵巢恶性肿瘤对
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卵巢癌是严重威胁妇女生命的恶性肿瘤,长期以来,尽管各种诊断与治疗方法不断完善和提高,使患者预后有所改善,但五年生存率仍较低,徘徊在25%～30%左右。由于多数卵巢恶性肿瘤对化疗敏感,特别是对以顺铂为基础的联合化疗敏感,使顺铂在卵巢癌的治疗中占有重要地位。但化疗耐药性的产生严重阻碍了化疗药物的抗肿瘤效应,其中以ERCCl基因高表达导致的顺铂耐药尤为重要。近年来发现的RNA干扰(RNA interfering,RNAi)是一种有效的基因沉默技术,能特异性地沉默靶基因的表达,在基因功能研究和抗肿瘤治疗方面得到了广泛应用。本实验利用RNA干扰技术,以腺病毒为载体,将针对ERCCl基因的外源性发夹环小干扰RNA片断导入腺病毒载体,通过基因重组技术构建稳定表达ERCCI-shRNA的重组体腺病毒,联合顺铂用药,体外实验观察腺病毒介导的RNA干扰ERCCl基因表达对卵巢癌顺铂耐药的逆转作用,为卵巢癌基因治疗逆转化疗耐药提供新的治疗途径。 第一部分ERCCl基因在卵巢癌细胞系中的表达及对卵巢癌细胞耐药的影响 目的:观察人卵巢癌细胞系中ERCCl基因的表达与卵巢癌顺铂耐药的关系。方法:应用RT-PCR方法检测ERCCl基因mRNA在卵巢癌细胞系COCl、COCl/DDP、A2780及A2780/TS中的表达,观察不同浓度顺铂作用24小时后基因表达的变化。结果:1、四种卵巢癌细胞系COCl、COCI/DDP、A2780及A2780/TS中均有ERCCI基因的表达,耐药亚系COCl/DDP和亲本COCl相比,前者ERCCl基因的表达量明显高于后者,统计学检验有显著差异(p<0.05);耐药亚系A2780/TS和亲本A2780相比,ERCCl基因的表达前者比后者略有升高,无统计学意义。2、不
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