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华蟾毒精又称华蟾酥毒基,属于蟾蜍二烯羟酸内酯类成分,是蟾酥的有效活性成分之一。华蟾毒精作为一种成分单一、结构明确的中药单体,越来越多地受到国内外药学研究人员重视,已有大量文献证实华蟾毒精具有抗肿瘤、免疫促进、调节心血管系统、止痛、抗病毒等作用。但华蟾毒精在肿瘤免疫治疗中的作用未见报道。本研究旨在探究华蟾毒精的P815AB肽抗原佐剂效应和增强肿瘤特异性免疫的作用机制。本研究首先采用P815AB肽与华蟾毒精单独或联合免疫DBA/2J小鼠,分别考察小鼠脾脏指数、胸腺指数,通过MTT法检测小鼠脾细胞增殖情况,通过体内外双重诱导考察小鼠CTL细胞活性,通过中性红法检测小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活性,通过流式细胞术检测小鼠外周血T细胞亚群分布,通过双抗夹心ELISA法检测小鼠外周血IFN-γ分泌情况。同时,本研究还以小鼠黑色素瘤B16细胞和RMA-S细胞为模型,分别通过流式细胞术和实时荧光定量PCR考察华蟾毒精对肿瘤细胞MHC-Ι类分子及其相关基因LMP2、LMP7、TAP1、TAP2基因mRNA表达情况。研究结果表明,与P815AB肽单独免疫相比,一定剂量的华蟾毒精与P815AB肽联合免疫可显著促进小鼠脾淋巴细胞增殖、显著增强小鼠CTL细胞活性、缓解P815AB肽单独免疫导致的小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活性下降、显著提高小鼠外周血CD3+CD4+CD8+T细胞和CD3+CD69+T细胞百分比,小鼠脏器指数和外周血IFN-γ分泌略有增加,但无统计学意义。同时,高浓度的CBG可极显著上调B16细胞LMP2、TAP1、TAP2分子及RMA-S细胞TAP1、TAP2分子mRNA表达,同时显著上调RMA-S细胞LMP2、LMP7分子mRNA表达,但不能显著提高B16及RMA-S细胞MHC-Ⅰ分子表达。以上结果提示,华蟾毒精具有一定的P815AB肽抗原佐剂效应,并具有通过上调肿瘤细胞LMP和TAP分子表达来提高肿瘤自身免疫原性的潜能。