钙含量对脱钙骨基质(DBM)诱导成骨活性影响的实验研究

来源 :中国人民解放军军医进修学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hgtata
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目的:研究脱钙时间与脱钙骨基质(demineralized bone matrix,DBM)钙含量的对应关系;研究不同钙含量对DBM诱导成骨活性的影响。方法:1、脱钙时间与脱钙骨基质(DBM)钙含量对应关系的研究:选用12只新西兰大耳兔处死后从其尺、桡骨上截取90块15mm长的骨块。按照预定的15个时间点(0h,1h,2h…12h,18h,24h)分成15组脱钙,得到不同钙含量的脱钙骨基质(DBM)样品。每块样品均用MOS(Metal-Oxide-Semiconductor)级的硝酸和盐酸混合溶液消解后以连续光源原子吸收光谱仪测定样品的钙含量。2、钙含量对脱钙骨基质(DBM)诱导成骨活性影响的研究:制备钙含量24.05%(未脱钙)、12.05%(脱钙3小时)、2.00%(脱钙8小时)和0.00%(脱钙24小时)的DBM。选用新西兰大耳兔建立节段性骨缺损模型。实验设空白对照组、植入钙含量24.05%DBM组,植入钙含量12.05%DBM组,植入钙含量2.00%DBM组,植入钙含量0.00%DBM组。分别在4、8、12周时行大体观察、X线摄片、Goldnet’s染色组织学切片观察定性了解新骨生长的情况,行荧光双标测量定量了解每天骨矿化再生的速率。结果:1、脱钙时间与脱钙骨基质(DBM)钙含量对应关系的研究结果显示:正常新西兰大耳兔前肢骨钙含量为24.05±1.01%。随着脱钙时间的延长,样品中的钙含量逐渐减少,样品钙含量降低的速率逐渐变慢。2、钙含量对脱钙骨基质(DBM)诱导成骨活性影响的研究结果显示:4周时,从大体观察、X线摄片和Goldner’s染色组织学切片观察等定性指标看,钙含量2.00%组表现出最旺盛的成骨活动,钙含量24.05%组成骨活性低于其他3组;荧光双标测量矿化沉积率显示钙含量2.00%组最高(P<0.05),钙含量12.05%组次之(P<0.05),钙含量0.00%组再次之(P<0.05),钙含量24.05%组最低(P<0.05)。8周时,上述定性观察显示钙含量2.00%组成骨最为活跃,钙含量24.05%组成骨活性低于其他3组;矿化沉积率测量显示钙含量2.00%组最高(P<0.05),钙含量12.05%组和0.00%组没有明显差别(P>0.05),钙含量24.05%组最低(P<0.05)。12周时,定性观察发现钙含量12.05%组、2.00%组、0.00%组之间的差别不明显,钙含量24.05%组则表现出较其它3组稍低的成骨活性;钙含量2.00%组表现出比12.05%组更高的矿化沉积率(P<0.05),钙含量12.05%组和钙含量0.00%组间以及钙含量2.00%组和钙含量0.00%组间的差别则没有统计学意义(P>0.05),矿化沉积率最低的是钙含量24.05%组(P<0.05)。结论:1.在脱钙过程中,样品钙含量降低速率表现为逐渐变慢的趋势。2.在修复新西兰大耳兔骨缺损的过程中,钙含量2.00%组都表现了比其它钙含量组更强的诱导成骨能力3.未脱钙骨的诱导成骨能力低于脱钙骨基质。
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