N-乙酰半胱氨酸对努比亚山羊受胎率的影响研究

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妊娠早期胚胎的丢失是人类和动物都存在的问题。已经发现N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)可增强卵母细胞的存活。然而,关于妊娠早期NAC补充是否会改善妊娠早期胚胎的附植和发育,进而提高受胎率研究报道较少。本研究以234只努比亚山羊为研究对象,采用PG(氯前列醇,下同)+PG、海绵栓+PG、海绵栓+PMSG、海绵栓+PMSG+PG 4种同期发情方法对母羊进行处理,对发情效果稳定的海绵栓+PG组的48只母羊进行子宫颈人工输精,平均分成3组,其中2组配种后第二天于饲粮中添加0.03%和0.07%NAC饲喂,持续饲喂至第30天。在饲喂第15天和第30天采集空白组和0.07%NAC组血样用于检测血清中E2、P4、NO和谷氨酸、鸟氨酸、精氨酸、脯氨酸4种氨基酸含量,采集子宫角组织用于转录组测序分析和qPCR验证,以探究NAC对妊娠早期山羊受胎率的影响。研究结果如下:综合同期发情率、21天返情率、24 h同期率、成本4个指标,同期发情的4种方法中,PG+PG法操作简单、成本低、效果好,利于生产实践推广应用,海绵栓+PG法效果较好且稳定,是开展试验研究的优先选择。4种处理方法发情时间主要集中于处理完成后2548 h之间,提示冬季最佳定时输精时间可在处理完成后2548 h之间进行。春季时,海绵栓+PG法效果优于冬季。对空白组和0.07%NAC饲喂组第15天和第30天生化指标进行检测。结果显示,NAC的饲喂增加了血清中NO的浓度,在第15天达到差异显著水平(P<0.05);雌二醇在第15天和第30天NAC饲喂组浓度均高于空白组(P>0.05),从第15天至30天组内均呈现上升趋势;孕酮两个时期浓度均是空白组高于NAC饲喂组(P>0.05),第15天至第30天组内变化趋势与雌二醇一致。在饲喂NAC的第15天和第30天,谷氨酸、精氨酸、脯氨酸浓度均高于空白组;组内第15天至第30天浓度变化,谷氨酸呈现上升趋势,精氨酸和脯氨酸呈现下降趋势;在饲喂NAC的第15天,鸟氨酸浓度空白组高于试验组,第30天时趋势相反。NAC产仔数量上,0.03%和0.07%NAC组分别较空白组提高产仔数0.25只和0.33只。在NAC喂养的第15天和第30天,0.07%NAC组与对照组子宫角组织转录组测序结果显示,共有277个基因表达水平显著改变,其中96个上调,181个下调。差异基因主要参与HIF-1信号通路、补体和凝血级联、mTOR信号通路、花生四烯酸代谢、IL-17信号通路、p53信号通路和其他免疫相关信号通路,以及TGF-β信号通路、催产素信号通路、类固醇生物合成、Hedgehog信号通路、wnt信号通路、胆固醇代谢、黄体酮介导的卵母细胞成熟和其他繁殖相关信号通路。列出了第15天和第30天与免疫和繁殖相关的前10个上调或下调差异基因,并选择其中6个用于qPCR验证,结果与测序结果一致。
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