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[背景与目的]红霉素是大环内酯类抗生素中的一种,广泛应用于支原体、衣原体感染。因其有严重的胃肠道反应,即使静脉应用也会造成恶心呕吐等,因而其临床应用受到一定局限。不过,这从另一方面提示其可能对胃动力有一定的作用。1984年,英国学者Pilot观察到红霉素可以促进胃蠕动,同年日本学者Itoh也证实小剂量红霉素可以诱发一个新的MMC(消化间期移行性肌电活动)。这些发现开创了胃动力研究的新里程。1986年,秦新裕等又证实大剂量红霉素可增加饱腹或空腹犬的小肠快波数,说明红霉素有促进胃肠动力的作用。近1 5年以来,临床上红霉素逐渐作为胃肠动力紊乱的治疗药物而得到广泛使用。近年来,对红霉素促胃动力的机制开展了大量的研究。大量药理学实验证明红霉素是胃动素受体的激动剂。外周方面,红霉素的促胃动力机制可能是通过肠自主神经系统内的乙酰胆碱能神经元或直接作用于平滑肌上的胃动素受体,引起乙酰胆碱释放,致胞内钙离子的释放和细胞膜电压依赖性钙通道开放,从而导致平滑肌的收缩。同时红霉素可以通过血脑屏障;胃动素受体可在哺乳动物的中枢神经系统内检测到;在中枢内微注射红霉素可加强胃动力,改变神经元放电活动;切断或冷冻迷走神经干可以影响胃动力。以上这些证明红霉素促胃动力存在中枢作用,且与迷走神经通路有关。但其具体作用机制并不明确。支配胃运动的胃迷走神经节前纤维主要起源于延髓的迷走神经背核,其内的胃迷走神经节前神经元作为中枢内胃运动调控的最后共同通路,不仅接受乙酰胆碱的调制,也接受谷氨酸能、GABA能、甘氨酸能突触传入,红霉素是否、以及如何通过对胃迷走神经节前神经元突触传入的调控影响胃运动尚缺乏研究。红霉素对中枢延髓水平其他细胞核团是否也有类似作用也未见报道。本研究通过胃壁注射示踪剂逆行追踪胃迷走神经节前神经元,采用膜片钳技术研究红霉素对其突触传入的调控及其相关机制,有可能在突触水平阐明红霉素促进胃动力的部分中枢机制。[研究内容]1、延髓脑片中胃迷走神经节前神经元的定位。2、红霉素对神经元突触传入的调节作用及其机制。3、通过比较红霉素对胃迷走神经节前神经元、心迷走神经节前神经元以及对呼吸运动相关神经元的作用,研究红霉素对胃迷走神经节前神经元作用的特异性。[方法]1、大鼠延髓脑片的制备。2、大鼠胃迷走节前神经元逆行荧光标记。3、大鼠胃迷走神经节前神经元、心迷走神经节前神经元的鉴定、突触前活动记录及神经药理学分离。[结果]1、通过胃壁用Rhodamine标记的中枢胃迷走神经节前神经元均位于迷走神经背核内。与之对照,通过心包脂肪垫标记的心迷走神经元和通过气管壁标记的呼吸运动相关神经元位于延髓疑核内。两者细胞定位与形态均有不同。2、红霉素抑制中枢胃迷走神经节前神经元的自发的和微小的甘氨酸能突触传入的频率,在大剂量条件下抑制其幅度。对自发的γ-氨基丁酸能抑制性突触后电流无明显影响。3、红霉素对心迷走运动神经元、呼吸运动相关神经元的甘氨酸能抑制性突触后电流的幅度和频率无作用。4、同等剂量的胃动素受体特异性阻断剂GM109可以阻断红霉素抑制中枢胃迷走神经节前神经元自发的和微小的甘氨酸能突触传入的作用,而GM109本身对胃迷走神经节前神经元甘氨酸能抑制性突触后电流的幅度和频率无影响。[结论]:1、通过胃壁逆行荧光标记的中枢胃迷走神经节前神经元均位于迷走神经背核内。2、红霉素对中枢胃迷走神经节前神经元的甘氨酸能突触传入有抑制作用,此作用属突触前抑制,非动作电位依赖。对γ-氨基丁酸能突触传入活动无作用。3、红霉素抑制胃迷走神经节前神经元的甘氨酸能突触传入,间接兴奋通过迷走神经,从而导致胃动力增加。这可能是红霉素促胃动力的中枢机制之一。4、红霉素对心迷走运动神经元、呼吸运动相关神经元的甘氨酸能抑制性突触后电流的幅度和频率无此作用说明红霉素促胃动力的中枢作用存在特异性。5、同等剂量的胃动素受体特异性阻断剂可以阻断红霉素抑制中枢胃迷走神经节前神经元甘氨酸能突触传入的作用。表明红霉素可能通过突触前膜上的胃动素受体发挥相关作用。