饲料中不同蛋氨酸/胱氨酸比值对斜带石斑鱼的生长及mTOR通路的影响

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本论文以斜带石斑鱼为研究对象,以鱼粉和大豆分离蛋白为蛋白源,配制蛋氨酸胱氨酸加和值固定(1.78%),比值不同的6组饲料,各组饲料蛋氨酸/胱氨酸比值分别为0.76、1.07、1.43、1.93、2.77、4.50。探究饲料不同蛋氨酸/胱氨酸比值对斜带石斑鱼生长性能、体组成、相关代谢酶、免疫指标、抗氧化指标以及对mTOR通路基因表达量的影响。将720尾约为11.66g的斜带石斑鱼随机分为6个处理组,每组4个重复缸,每缸30尾鱼,各处理组每天两次饱食投喂一种试验饲料,试验持续8周。主要研究结果如下:斜带石斑鱼增重率、特定生长率、饲料效率和蛋白质效率随着饲料蛋氨酸/胱氨酸比值的升高先升高后降低(P<0.05),均在比值为2.77时最高,饲料蛋氨酸胱氨酸比值在1.43-4.50时,增重率和特定生长率差异不显著。饲料不同蛋氨酸/胱氨酸比值对斜带石斑鱼摄食率、肝体指数、肥满度、存活率、全鱼粗脂肪、全鱼水分和全鱼灰分没有显著影响(P>0.05),斜带石斑鱼全鱼粗蛋白在蛋氨酸/胱氨酸比值为0.76时最低,显著低于其它五组(P<0.05)。饲料蛋氨酸/胱氨酸比值斜对带石斑鱼肝脏中的蛋氨酸合成酶、甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶和S-腺苷高半胱氨酸水解酶活性影响差异不显著(P>0.05),随着饲料蛋氨酸/胱氨酸比值升高,胱硫醚-β-合成酶和谷丙转氨酶活性逐渐升高(P<0.05),谷草转氨酶活性先升高后降低(P<0.05),在蛋氨酸/胱氨酸比值为1.93时最大。斜带石斑鱼血清免疫指标中,免疫球蛋白M和补体C3含量,碱性磷酸酶和溶菌酶活性随着饲料蛋氨酸/胱氨酸比值升高先升高后降低,酸性磷酸酶在比值为1.43时最大,饲料蛋氨酸/胱氨酸比值在1.43-4.50之间时,血清各免疫指标差异均不显著(P>0.05)。肝脏抗氧化指标中,谷胱甘肽过氧化物酶活性、过氧化氢酶活性、总抗氧化能力和丙二醛含量随着饲料蛋氨酸/胱氨酸比值升高先升高后降低(P<0.05),超氧化物歧化酶在蛋氨酸/胱氨酸比值为1.93时最大,当饲料蛋氨酸/胱氨酸比值在1.93-2.77时,斜带石斑鱼肝脏具有较好的抗氧化能力。综上所诉,在本试验条件下,饲料在蛋氨酸/胱氨酸比值在1.93-2.77时,斜带石斑鱼具有更好的生长性能、代谢酶活性、免疫能力以及抗氧化能力。饲料不同蛋氨酸/胱氨酸比值对斜带石斑鱼肝脏中RagA/B、RagC/D、Raptor、mLST8和V-ATPase的mRNA相对表达量没有显著影响(P>0.05)。Ragulator的mRNA在蛋氨酸/胱氨酸比值为4.50时显著下调,蛋氨酸/胱氨酸比值为0.76时,mTOR、S6K、eIF4E、eIF4B和S6的mRNA相对表达量显著下调(P<0.05),过高的蛋氨酸/胱氨酸比值(4.50)也会导致S6的mRNA相对表达量显著下调(P<0.05)。4E-BP的mRNA相对表达量随蛋氨酸/胱氨酸比值升高先下调后上调(P<0.05)。在肌肉中,V-ATPase、RagA/B、mLST8、mTOR、S6K、eIF4E的mRNA相对表达量随蛋氨酸/胱氨酸比值升高先上调后下调(P<0.05),4E-BP的mRNA相对表达量与以上情况刚好相反。蛋氨酸/胱氨酸比值为0.76时,RagC/D、eIF4B和S6的m RNA相对表达量显著低于其它各组(P<0.05)其它各组差异不显著,蛋氨酸/胱氨酸比值为4.50时,Ragulator的m RNA相对表达量显著低于其它各组(P<0.05),其它各组差异不显著。Raptor的mRNA相对表达量随蛋氨酸/胱氨酸比值升高显著上调(P<0.05)。以上结果表明:饲料中不同的蛋氨酸/胱氨酸比值会对m TOR路通基因的表达产生显著影响,适宜的蛋氨酸/胱氨酸比值(1.93-2.77)有利于mTORC1的激活和控制合成蛋白相关基因的表达上调,促进斜带石斑鱼肝脏和肌肉中的蛋白质合成。
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