目的:建立幽门螺杆菌感染模型,并探讨外界因素对幽门螺杆菌感染模型建立的影响;研究幽门螺杆菌外膜蛋白HopX对胃粘膜细胞生长的影响,为深入研究幽门螺杆菌的致病机制奠定基础。方法:1、常规培养幽门螺杆菌标准菌株NCTC11637,采用革兰染色、快速尿素酶试验和氧化酶试验进行鉴定;2、幽门螺杆菌感染模型建立:40只雄性BALB/C小鼠适应性饲养1周后随机分成两组,即Hp组和对照组。Hp组Hp菌液灌胃,0.4ml/只(约含Hp为10~9个/ml),所有动物灌胃前禁食12小时、禁水4小时,隔日一次,连续5次,10天完成;灌胃结束后再饲养4周后处死,分离胃组织,将其沿胃大弯纵向剪开,用无菌生理盐水洗净胃内残留物,纵向一分为二,一半用于快速尿素酶试验,另一半10%甲醛固定,石蜡包埋,5μm切片、苯胺蓝染色进行Hp定植评价。3、外界因素对幽门螺杆菌感染模型建立的影响:40只BALB/C小鼠适应性饲养1周后随机分为双重因素组、单纯Hp组、单纯心理组、对照组,通过Hp菌液灌胃和电击造模,电击结束后处死动物,行Hp感染鉴定,同时观察胃粘膜损伤情况。40只雄性BALB/C小鼠适应性饲养1周后随机分成两组,即茶水组、纯净水组;茶水给予3%茶水,一直持续到实验结束;纯净水组则给予普通饮用纯净水。两组小鼠都Hp菌液灌胃,灌胃结束后再饲养4周后处死,行Hp感染鉴定。4、用含10%小牛血清的RPMI1640培养液常规培养胃癌细胞SGC7901,加入不同浓度HopX蛋白,应用细胞计数、细胞活力、MTT、Hoechest33258荧光染色等方法分析HopX对细胞增殖的影响;收集培养上清,ELISA法检测IL-8的分泌量;提取细胞总RNA,用荧光定量RT-PCR法检测IL-8mRNA表达水平。结果:1.成功建立了幽门螺杆菌感染模型,明确了心理应激和茶水对幽门螺杆菌感染模型建立的影响;2.HopX可诱导胃癌细胞SGC7901表达和分泌IL-8,该效应呈浓度依赖性;HopX可抑制SGC7901细胞的增殖及活力,呈剂量-时间依赖关系。结论:成功建立了幽门螺杆菌感染模型;明确了心理应激和茶水对幽门螺杆菌感染模型的建立有一定影响;HopX对胃癌细胞生长、IL-8分泌与表达有一定的抑制作用,其抑制作用与浓度和作用时间有一定关系。