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以ICR小鼠体内受精胚胎(原核胚)为试验材料,探讨不同的培养液、生长因子及培养气相对小鼠胚胎体外发育的影响,目的在于寻找一种适合于ICR小鼠胚胎的培养液成分及培养环境,优化小鼠胚胎体外培养体系。同时也为其它哺乳动物胚胎的体外培养提供参考。论文包括四个试验,每个试验重复至少5次,试验所得到的卵裂率、囊胚率均用平均数±平均标准误表示,而囊胚细胞数用平均数±标准差表示,采用SAS统计软件进行分析。具体结果如下:(1)对比研究了mKSOM、HTF、CZB三种培养液对小鼠原核胚体外发育的影响。结果显示,三组之间的卵裂率为74.1±5.6%、64.3±7.3%、71.9±6.1%,差异不显著(P>0.05);三组之间的囊胚率分别为15.0±6.8%、8.1±4.9%、19.9±7.7%,囊胚总细胞数为66.4±21.7、68.0±7.3、66.7±16.9,差异都不显著(P>0.05),但mKSOM组的培养效率较佳。(2)研究了每毫升含1ng、5ng、10ng EGF或10ng bFGF、100ng bFGF的mKSOM对小鼠原核胚体外发育的影响,结果发现,三组含EGF的卵裂率分别为69.0±10.1%、73.2±5.9%、72.2±8.1%,各组之间差异不显著(P>0.05);囊胚率分别为26.6±12.9%、18.2±7.1%、29.2±15.5 % ,10ng/ml EGF组稍高于其它两组(P>0.05),囊胚总细胞数分别为62.5±19.9、51.0±9.7、54.8±15.4 ,1ng/mlEGF组略高于其它两组但差异不显著(P>0.05);两组含bFGF的卵裂率分别为62.9±9.4%、59.0±8.9%,差异不显著(P>0.05)。两组之间的囊胚率分别为23.6±7.8%、25.4±7.3%差异也不显著(P>0.05)。(3)研究了微孔培养体系(well of the well system ,WOW)法和成组培养法对小鼠原核胚体外发育的影响,结果发现,两组的卵裂率分别为93.6±2.4%和83.2±4.8%差异不显著(P>0.05);两组的囊胚率分别为74.6±5.1%和38.2±6.6%,囊胚总细胞数分别为76.2±2.7、58.7±4.9,WOW组显著高于成组培养法,差异显著(P<0.05)。(4)研究了Lung air(肺气)、5%氧气、20%氧气三种不同的培养气相对小鼠原核胚体外发育的影响,结果发现:mKSOM组的卵裂率分别为63.2±5.8%、69.7±5.8%、59.7±5.8%,三种气相培养差异不显著(P>0.05);囊胚率分别为6.7±5.1%、22.6±5.1%和6.1±5.1%,5%的氧气组显著高于其它两组(P<0.05),但其它两组差异并不显著,囊胚总细胞数分别为39.3±7.1、37.2±5.8、66.8±7.1,20%的氧气组显著高于其它两组(P<0.05),但其它两组差异并不显著;HTF组的卵裂率分为44.1±5.8%、60.2±5.8%、54.8±5.8%,各组间差异也不显著(P>0.05);囊胚率分别为0±0.0%、6.7±5.1%和2.8±5.1%,囊胚总细胞数分别为0±0.0、23.7±8.2、19.0±8.2,各组之间差异不显著(P>0.05);CZB组的卵裂率分别为64.4±5.8%、59.7±5.8%、57.9±6.2%,差异也不显著(P>0.05);囊胚率分别为16.2±5.1%、28.7±5.1%和16.4±5.4%,各组之间差异不显著(P>0.05),但5%氧气培养组的囊胚率最高,囊胚总细胞数分别为53.8±3.3、43.3±3.6、49.7±5.3,20%氧气组与另外两组差异不显著,但其它两组差异非常显著(P<0.05)。此外,培养基CZB在三种气相条件下囊胚率都较高,虽然统计学上差异不显著(P>0.05);但是,肺气和20﹪O2气相下囊胚总细胞数能显著提高(53.8±3.3,49.7±5.3 vs. 43.3±3.6,P<0.05)。说明5%氧气组和肺气组的培养气相都可以用于小鼠自然胚的体外培养。综上所述,小鼠原核胚体外培养的过程中,选择(1)mKSOM培养基,使用WOW法在含5%氧气的气相条件下;或者(2)CZB+WOW+Lung air的培养效果都比较好。