氧化石墨烯血液相容性及毒性机制研究

来源 :中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:greatspy_52
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
氧化石墨烯(GO)由于其独特优良的电学、光学和力学性质等,在生物医学领域,包括靶向药物输运、细胞成像、生物检测、肿瘤治疗等方面有广泛应用前景,由此引发的GO生物安全性研究也快速进展着。然而GO的血液相容性研究还没有引起关注,GO与血浆蛋白的相互作用机制和功能影响研究尚未开始,GO对白细胞活性和功能的影响还处于研究空白。针对上述问题,我们开展了GO类纳米材料(GONS)的血液相容性研究,重点开展不同性质GONS与血浆蛋白、血液细胞的作用、机制及功能影响研究,并探索GONS血液相容性的影响因素和规律,具体研究工作从以下两个方面开展:  1.制备三种不同性质的GONS,包括原初GO、羧基化的GO(GO-COOH)以及聚乙烯亚胺修饰的GO(GO-PEI)。以人外周血T淋巴细胞为研究对象,从细胞活性、细胞膜完整性、胞内活性氧(ROS)水平、DNA损伤、细胞凋亡、T淋巴细胞免疫功能、钙离子机制等方面系统的研究GONS对T淋巴细胞的毒性影响,并分析潜在的毒性机制。研究发现GO和GO-COOH在浓度低于25μg/mL时对人原代外周血T淋巴细胞显示出良好的生物相容性,浓度高于50μg/mL时表现出明显的细胞毒性,而GO-PEI即使在低浓度下(1.6μg/mL)也表现出强烈的细胞毒性。通过高浓度下(100μg/mL)一系列的T淋巴细胞毒性分析,我们提出了GONS可能的毒性机制: GO通过与T淋巴细胞膜上蛋白受体的直接作用,抑制其与配体的结合,影响细胞正常的信号通路,从而导致了依赖于ROS途径的被动凋亡。GO-COOH同样会与膜蛋白受体结合从而导致细胞凋亡,但这种凋亡是不依赖于ROS水平提高的,而是与胞内钙离子水平下调有关。GO-PEI通过破坏细胞膜对T淋巴细胞产生毒性。  2.选择人血清白蛋白(HSA)作为模型蛋白,从结合常数、作用机制、构象变化以及功能影响方面来研究GONS对蛋白质的影响。研究得出GONS都可以和HSA相结合,这说明GONS是用于蛋白质自组装的优良二维载体。通过等温滴定量热和pH依赖性实验分析,得出GONS与HSA的作用力因素非常复杂,包括共价键、氢键、静电作用力、疏水作用力、π-π堆积力等。分别讨论三种不同的GONS,GO会通过自身的活性基团与HSA发生共价结合,氢键也在两者的相互作用中发挥作用。GO-COOH通过氢键作用和HSA表现出很强的亲和力,有利的是,GO-COOH对HSA表现出很好的生物相容性,对HSA结构和功能的影响微乎其微。GO-PEI则表现出完全相反的性质,它和HSA的亲和力最弱,却几乎完全破坏HSA的空间结构,导致HSA的功能受到严重影响。此外,通过GONS与HSA相互作用研究还得出了纳米材料抑制蛋白质功能的两种方式:(1)破坏蛋白质结构导致功能受损,如GO-PEI;(2)封闭蛋白质活性位点从而抑制功能发挥,如GO。  综上,本论文分别从血浆蛋白和血液细胞水平探索GONS的血液相容性,并研究GONS的毒性机制以及影响规律,这对GONS纳米材料在生物医学领域的应用具有重要意义。
其他文献
电压门控钾离子通道(Kv)是一类可选择性通透钾离子的跨膜蛋白,它参与动作电位的形成,直接影响神经元和肌肉细胞的兴奋性。Kv4是其中一类通导快速瞬时电流(fast transient curre
日益增长的大气氮沉降一方面增加了陆地植被的可利用性氮源,另一方面又可能使局部地区出现氮饱和、甚至氮过量,进而造成严重的负面影响。因此,探讨植物对大气氮沉降的响应与
现代电力系统是一个典型的高维数、强非线性复杂动态系统,其正常运行时不断遭受各种各样的扰动。因此,电力系统的安全稳定问题一直受到人们的广泛关注。电力系统故障时,汽门控制能够减少因机械功率与电磁功率不平衡而引起的转速波动和功角摆动,有利于系统重新建立同步。励磁控制能调节发电机机端电压和无功功率,是电力系统控制领域最常用最经济的控制手段之一。将汽门控制和励磁控制相结合,能提高系统故障后的收敛速度,有利于
产卵期家蝇Musca domistica L.(双翅目:环裂亚目:家蝇科)卵巢中产生的信息化学物质诱引产卵雌蝇到共同的场所产卵.证实了家蝇新产卵上存在能引诱产卵雌蝇到共同产卵场所的信
目的:探讨胃癌患者围手术期外周血、淋巴结及腹腔冲洗液CEAmRNA的表达与胃癌微转移关系及临床意义.方法:(1)应用逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)和ELISA方法同时检测40例胃癌、
2001-2002年在河南师范大学小麦试验田选用河南省有代表性的18个小麦品种作为试验材料,随机区组试验设计,讨论了小麦各性状的遗传特性,小麦穗部性状对小麦籽粒戊聚糖含量等品质
磷是构成生命的最重要的元素之一.它是能量代谢、核酸及膜的合成的重要底物.中国是世界上最大的小麦生产国,但是中国小麦主产区的土壤都不同程度地存在着缺磷的问题.培育耐低
该文报告了一株光合细菌C菌株分离、纯化、鉴定的结果,以及对其生长条件与色素合成条件、类胡萝卜素稳定性研究的结果.C菌株为革兰氏染色阴性,大小为0.6-0.9×1.0-1.9μm,单
该文对萝摩科翅果藤属杆物翅果藤(Myriopteron extensum(Wight)K.Schum)的成分进行了研究,共分离并鉴定了23个化合物,其中4个为新化合物.通过活性筛选发现了两个具抗癌活性的
紫茎泽兰是一种世界性的恶性杂草,在国家环保总局首批公布的国内16种外来入侵物种中名列第一,其入侵中国西南地区后已经造成严重的生态破坏和经济损失.但多年来中国对紫茎泽