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目的:急性髓系白血病是以骨髓和/或外周血中幼稚细胞增多为特征的血液系统恶性克隆性疾病。在过去的30年中,尽管联合应用阿糖胞苷加葸环类抗肿瘤药物化疗后取得了较好的疗效,但急性髓系白血病患者总体预后仍旧较差,其中主要原因是白血病细胞多药耐药的产生;因此逆转白血病细胞的多药耐药是治疗急性髓系白血病的关键。多药耐药相关蛋白4是ATP结合盒转运蛋白C超家族成员,在许多肿瘤及其细胞株中过表达并伴随着较差的预后,但在急性髓系白血病中研究较少。因此我们选用急性髓系白血病患者骨髓、K562及其耐阿霉素的细胞株(K562/ADR),检测MRP4表达,随后运用RNA干扰技术沉默K562/ADR细胞株中的MRP4基因,来研究能否逆转K562/ADR对阿霉素的耐药性并增加对阿霉素的敏感性。方法:以75例初治、23例复发急性髓系白血病患者及20例正常对照为研究对象,应用RT-PCR法检测骨髓单个核细胞中MRP4mRNA表达;应用Western Blot法检测K562及K562/ADR细胞株中MRP4蛋白的表达。构建5个针对MRP4基因的慢病毒介导的siRNA (1v-shRNAs-MRP4)。运用荧光显微镜观察1v-shRNA-MRP4感染K562/ADR细胞株的感染效率。应用Real-Time PCR及Western Blot法检测感染1v-shRNA-MRP4后K562/ADR细胞MRP4基因mRNA及蛋白表达。应用MTS法检测感染1v-shRNAs-MRP4后K562/ADR细胞增殖活性、流式细胞术检测K562/ADR细胞凋亡。结果:初治及复发急性髓系白血病患者MRP4mRNA表达均明显高于正常对照组,差异均有统计学意义(p<0.05);同时初治组与复发组比较,差异亦有统计学意义(p<0.05);高白细胞数及中等/差的染色体核型MRP4mRNA表达明显增高,高表达MRP4患者生存期与低表达患者比较明显缩短。K562/ADR与K562比较MRP4蛋白表达明显增高。从荧光显微镜观察结果可见K562/ADR细胞1v-shRNA-MRP4感染效率达到80%以上。Lv-shRNA1-MRP4对MRP4基因的表达较其它1v-shRNAs-MRP4有显著抑制作用(p<0.05),抑制效率达80%以上。在K562/ADR细胞中1v-shRNA1-MRP4组mRNA及蛋白表达较对照组明显减低(p<0.05)。联合1v-shRNA1-MRP4和阿霉素K562/ADR细胞生长受抑且细胞凋亡增加。结论:MRP4与急性髓系白血病的发生、发展及预后有关;MRP4基因可能参与了K562/ADR细胞株多药耐药机制;慢病毒介导的siRNA沉默MRP4基因可增强急性髓系白血病对阿霉素的敏感性。