【摘 要】
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目的:研究IL-33在粉尘螨I类变应原Der f1诱发的过敏性哮喘中的作用。方法:1.大剂量表达并纯化粉尘螨I类变应原Der f1蛋白。2.制备Der f1诱发的哮喘小鼠模型:将40只SPF级BALB/
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目的:研究IL-33在粉尘螨I类变应原Der f1诱发的过敏性哮喘中的作用。方法:1.大剂量表达并纯化粉尘螨I类变应原Der f1蛋白。2.制备Der f1诱发的哮喘小鼠模型:将40只SPF级BALB/c雌性小鼠随机分为哮喘组、PBS组、免疫治疗组和抑制剂组四组,每组10只。除PBS组外,其余三组分别在第0、7、14天经小鼠腹腔注射致敏液,同时给予抑制组小鼠腹腔注嘌呤抑制剂PPADS。第21天起,除PBS组外,其余三组分别雾化吸入上述致敏液,PBS组则用PBS液雾化吸入,每天雾化30min,1次/天,连续7天。PBS组小鼠用PBS腹腔注射和滴鼻激发。在完成最后一次雾化24小时后处死小鼠,集取每组小鼠的支气管肺泡灌洗液(BALF)和血清,并计数BALF中嗜酸性粒细胞(EOS),取小鼠肺组织制作病理切片。ELISA检测BALF中IL-5、IL-13、IFN-γ和IL-33的含量及血清中特异性IgE和IgG2a水平。用Western-blot法检测肺组织中IL-33蛋白的表达变化。结果:SDS-PAGE和Western bloting说明了Der f1蛋白表达纯化成功;肺组织病理切片镜检说明,免疫治疗组和抑制剂组小鼠均比哮喘组炎症明显好转,炎症细胞浸润减少。小鼠BALF中EOS结果为抑制剂组和免疫治疗组嗜酸性粒细胞数明显低于哮喘组(P<0.01)。BALF中IL-5、IL-13及IL-33细胞因子含量免疫治疗组和抑制剂组明显低于哮喘组(P<0.01),而IFN-γ的变化则相反,免疫治疗组明显比于哮喘组高(P<0.01)。血清中特异性IgE含量结果为免疫治疗组和抑制剂组明显要比哮喘组低(P<0.01),IgG2a变化与IgE变化正好相反,免疫治疗组明显高于哮喘组(P<0.01)。哮喘组小鼠肺组织中IL-33蛋白的表达情况明显高于其他组。结论:成功表达纯化Der f 1蛋白;IL-33在Der f1诱发的过敏性哮喘中可能发挥着重要的作用。
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