持留菌（Persisiter）是细菌在响应高浓度抗生素时,所形成的一小部分处于休眠的细菌亚群,其形成与临床上难以根除的慢性感染、回复性感染和顽固性生物膜感染密切相关。多药物外排泵影响持留菌形成已得到广泛报道,而其上游调控因子对持留菌形成的影响却鲜有报道。Acr R（acriflavine resistance regulator）是一种普遍存在于细菌中且序列高度保守的蛋白,其作为一种典型的多药物外排泵Acr AB的负调控因子而被认识。维氏气单胞菌是一种感染经济养殖鱼类的病原菌,且具有多重耐药性的特点,对于水产养殖业具有一定的危害。因此,本研究将缺失了acrR基因的维氏气单胞菌株作为主要的研究对象,探索acrR在持留菌形成过程中发挥的功能。一方面,探究acrR对外排泵acr AB基因的调控关系。首先,构建了维氏气单胞菌的acrR基因敲除株（ΔacrR）和acrR基因的回补株（ΔacrR-p BBR-acrR）。通过生长特性的测定,发现在M9液体培养基中acrR的缺失不会对维氏气单胞菌的生长造成影响。通过RT-q PCR实验,比较分析WT、ΔacrR及ΔacrR-p BBR-acrR菌株中acr AB基因的表达水平,发现在对数期ΔacrR菌株中acr AB基因的表达水平显著高于WT中acr AB基因的表达水平,而在稳定期二者无明显区别。进一步研究发现Acr R对acr AB具有负调控作用,说明acrR下调acr AB基因的表达。另一方面,阐明acrR对持留水平的影响。首先,对WT菌株、ΔacrR菌株、ΔacrR-p BBR-acrR菌株、acr A基因敲除株（Δacr A）和acr B基因敲除株（Δacr B）的外排泵活性进行测定,结果表明在对数期ΔacrR菌株的外排活性显著强于WT菌株,而在稳定期ΔacrR菌株的外排活性同WT菌株无明显区别。不论处于对数期还是稳定期,Δacr A和Δacr B菌株的外排活性都显著低于其他三株菌。其次,测定菌株在抗生素处理下的药敏曲线,发现对数期ΔacrR菌株在氯霉素、四环素和噻孢霉素的作用下,持留生成率较WT菌株更高;稳定期ΔacrR和WT菌株的持留菌形成无明显差异;而对数期或稳定期时相较于ΔacrR和WT,Δacr A和Δacr B菌株表现为持留菌形成降低。最后,用外排泵抑制剂CCCP预处理WT及ΔacrR菌株后再进行药敏曲线测定,发现同未经过CCCP预处理的菌株相比,此时的WT及ΔacrR菌株的持留菌形成明显降低。以上实验结果说明,acrR在对数期是通过抑制acr AB的表达影响细菌的外排活性,从而降低持留菌的形成。同时acrR在稳定期对acr AB无调控作用,故此时WT及ΔacrR菌株的持留菌形成率无明显差异。本研究提出了acrR影响细菌持留形成的分子机制,扩展了acrR在病原菌中的功能研究,为防治由维氏气单胞菌引起的水产病害、抵抗药物耐受和细菌持留提供潜在药物靶标和新型防控策略。