【摘 要】
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目的:本实验旨在研究intermedin（IMD）是否通过上调长链非编码RNA转移相关的肺腺癌转录本1（lncRNA MALAT1）的表达减轻缺氧/复氧（H/R）导致的肾小管上皮细胞凋亡,从而探讨IMD减轻急性肾损伤（AKI）的机制。方法:以体外常规培养的人肾小管近端上皮细胞（HK-2）作为实验对象,用氯化钴（CoCl2）建立缺氧/复氧（H/R）模型,分为对照组、H/R组、H/R+IMD组、H/R
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目的:本实验旨在研究intermedin（IMD）是否通过上调长链非编码RNA转移相关的肺腺癌转录本1（lncRNA MALAT1）的表达减轻缺氧/复氧（H/R）导致的肾小管上皮细胞凋亡,从而探讨IMD减轻急性肾损伤（AKI）的机制。方法:以体外常规培养的人肾小管近端上皮细胞（HK-2）作为实验对象,用氯化钴（CoCl2）建立缺氧/复氧（H/R）模型,分为对照组、H/R组、H/R+IMD组、H/R+IMD+SiRNA组、H/R+IMD+NC组。显微镜下观察HK-2细胞的形态变化;用MTT 比色法检测不同组别的细胞活力;用荧光显微镜预估细胞转染效率;荧光定量逆转录方法检测lncRNA MALAT1的表达,评估IMD对lncRNA MALAT1的影响;用蛋白免疫印迹法测定半胱氨酸蛋白酶-3（caspase-3）活性片断表达和酶联免疫法检测caspase-3的活性,观察IMD对肾小管上皮细胞凋亡的影响。结果:在倒置显微镜下可见正常细胞贴壁生长,卵圆形,细胞之间接触正常,CoCl2诱导缺氧后,细胞形态发生明显变长、呈梭形,排列结构紊乱,有少数细胞漂浮;IMD预处理后,细胞形态有所改变。MTT 比色法表明在缺氧后细胞活力明显下降（P<0.05）,IMD处理后细胞活力明显提高（P<0.05）,IMD干预的同时抑制lncRNA MALAT1的表达,可见细胞活力明显低于单纯IMD处理组。RT-PCR结果显示缺氧可lncRNAMALAT1的表达有所提高（P<0.05）,IMD预处理后进一步提高了 lncRNA MALAT1的表达（P<0.05）。Wb和caspase-3活力检测结果显示缺氧可诱导caspase-3活性片段表达增加（P<0.05）,IMD处理后减少了 caspase-3活性片段表达（P<0.05）,与IMD处理组相比,抑制lncRNAMALAT1的表达可降低caspase-3活性片段的表达（P<0.05）,综上所述,IMD通过上调lncRNAMALAT1的表达减轻缺氧诱导的肾小管上皮细胞的凋亡,保护其免受H/R的损伤。结论:（1）IMD 可以上调 lncRNA MALAT1 表达;（2）IMD可以通过上调lncRNAMALAT1的表达减轻缺氧诱导的肾小管上皮细胞的凋亡,保护其免受H/R的损伤。
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