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第一部分HPLC法检测兔胫骨及骨髓中的左氧氟沙星目的:建立反相高效液相色谱仪(high performance liquid chromatography,HPLC)检测兔胫骨及骨髓中左氧氟沙星的方法,用于评价纳米微球载左氧氟沙星可控降解骨修复材料中的左氧氟沙星在兔局部骨组织及骨髓中的缓释特点。方法:分别将不同浓度左氧氟沙星加入空白胫骨、骨髓,以环丙沙星作为内标,采用Sepax BR-C18(250 mm×4.6 mm 5mm)色谱柱,流动相为:0.01 mol/L磷酸二氢钾—甲醇—0.5 mol/L四丁基溴化铵(75:25:4),流速:1.0 ml/min,柱温:40℃,紫外检测波长290 nm。评价指标为:专属性、检测线、定量线、回收率、稳定性、精密度。结果:当胫骨中的左氧氟沙星浓度在0.05mg/ml~300mg/ml范围内线性关系良好(r=0.999);低、中、高3个浓度的方法回收率分别为(108.81±1.14)%、(96.85±3.64)%、(114.38±0.27)%;提取回收率分别为(110.92±0.42)%、(110.48±0.97)%、(80.39±0.08)%;日内精密度的RSD分别为1.30%、0.23%、5.51%;日间精密度的RSD分别为:7.09%、3.71%、2.55%,样品稳定性良好。骨髓中的左氧氟沙星浓度在0.01mg/ml~300mg/ml范围内线性关系良好(r=0.999);低、中、高3个浓度的方法回收率分别为(91.67±3.73)%、(101.77±0.26)%、(87.72±0.72)%;提取回收率分别为(102.97±0.81)%、(87±0.62)%、(99.97±1.15)%;日内精密度的RSD分别为1.49%、1.06%、0.11%;日间精密度的RSD分别为:5.61%、2.56%、2.37%,样品稳定性良好。结论:本方法操作简便、灵敏、稳定、回收率高,适用于检测新型载药骨修复材料中的左氧氟沙星在兔局部骨组织中的分布。第二部分载左氧氟沙星介孔氧化硅微球/纳米羟基磷灰石/聚氨酯复合材料治疗兔胫骨感染性骨缺损的研究目的:评价新型载左氧氟沙星介孔氧化硅微球/纳米羟基磷灰石/聚氨酯复合材料治疗兔胫骨慢性骨髓炎的疗效。方法:建立兔胫骨慢性骨髓炎动物模型60只,将其分5组。A组动物仅清创,作为空白对照组(Blank control);B组植入1mg Lev@PMMA;C组植入5mg Lev@PMMA;D组植入1mg Lev@MSNs/n-HA/PU;E组植入5mg Lev@MSNs/n-HA/PU。在术后1W、3W、6W、12W观察大体病理学、影响学、Micro CT、组织学。评价新型复合材料诱导成骨能力、材料有无降解,评价新型支架材料治疗慢性骨髓炎的效果。结果:1.大体病理学Blank control组的胫骨具有典型的骨髓炎表现,胫骨破坏严重、有死骨形成。其余四个载药材料组表现为:骨修复材料与胫骨结合紧密,材料不易拔出。2.放射学Blank control组胫骨中上段骨组织明显肿胀、骨密度降低、骨破坏明显、骨皮质呈“壳”样隆起、死骨形成、边界不清、溶骨性病灶、骨皮质变薄。1mg Lev@PMMA组、5mg Lev@PMMA组可见完整的PMMA材料。3.新骨生成量5mg Lev@MSNs/n-HA/PU组的成骨量与1mg Lev@MSNs/n-HA/PU组、5mg Lev@PMMA组、1mg Lev@PMMA组、Blank control组均有统计学差异(P<0.05);1mg Lev@MSNs/n-HA/PU组与1mg Lev@PMMA组及Blank control组有统计学差异(P<0.05)。4.VG染色Blank control组骨质较稀疏。在1mg Lev@PMMA组、5mg Lev@PMMA组材料表面,有新生骨小梁迁延生长。在1mg Lev@MSNs/n-HA/PU组、5mg Lev@MSNs/n-HA/PU组材料的内部,新生骨小梁沿着孔隙生长。其中5mg Lev@MSNs/n-HA/PU组材料与骨小梁相互缠绕,结合紧密。5.HE染色Blank control组有大量炎症细胞聚集,1mg Lev@PMMA组有少量炎症细胞存在,而其余三组均无炎症细胞存在。结论:介孔氧化硅微球/纳米羟基磷灰石/聚氨酯复合材料载5mg左氧氟沙星治疗由金黄色葡萄球菌导致的兔胫骨慢性骨髓炎的效果优于其它组,适用于治疗慢性骨髓炎。