电针对模拟失重小鼠比目鱼肌Akt/Atrogin-1、MuRF-1相关信号通路的影响

来源 :上海中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:longzhulx
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目的  通过观察电针对模拟失重小鼠比目鱼肌湿重、肌重体重比、形态学改变和对其Atrogin-1、MuRF-1、IGF-1、pAkt、Foxo3amRNA及蛋白表达水平的影响,研究电针干预对失重性骨骼肌萎缩的有效性及其作用规律,为有效对抗失重性骨骼肌萎缩提供新的方法和实验依据。  方法  采用尾部悬吊方法建立模拟失重小鼠模型,分为正常对照组、模型组、预防电针组、同步电针组4组。电针取穴足三里、阳陵泉,频率20~30HZ,电流1mA,每次15分钟。观察周期共28天,其中预防电针组前14天电针后14天造模,同步电针组后14天电针并造模。28天时取比目鱼肌称重,并计算比目鱼肌湿重、比目鱼肌湿重体重比,HE染色观察肌肉形态学变化;免疫组化检测Atrogin-1、MuRF-1、Foxo3a、IGF-1、pAkt表达;Westernblot检测Atrogin-1、Foxo3a、IGF-1、pAkt、Akt的蛋白水平;Real-TimePCR检测Atrogin-1、MuRF-1、Foxo3a、IGF-1、pAkt的mRNA水平。  结果  1.与对照组相比,模型组小鼠体重明显降低,其比目鱼肌肌肉湿重和湿重体重比分别下降了55.6%和44.3%,同步电针组和预防电针组在体重、比目鱼肌湿重和湿重体重比方面与模型组均未见显著性差异。  2.HE染色对照组见小鼠比目鱼肌肌纤维排列整齐,肌纤维间排列紧密,肌膜平滑,细胞核位于肌纤维周边;模型组见肌纤维结构紊乱、松散,肌纤维间隙增加、肌纤维间分界不清,有呈病灶性表现,结缔组织增生显著。同步电针组和预防电针组的肌纤维排列紊乱减轻,结缔组织增生不明显。  3.Atrogin-1和Foxo3a以免疫组化、Westernblot和RealtimePCR方法的检测显示,二者在模型组较对照组明显高表达,而在同步电针组和预防电针组的表达降低。  4.MuRF-1以免疫组化和RealtimePCR方检测,MuRF-1在模型组明显高表达,而同步电针和预防电针干预方法能明显降低MuRF-1的表达。  5.IGF-I和pAkt以免疫组化、Westernblot和RealtimePCR的方法检测显示,在模型组较对照组的表达明显降低,同步电针和预防电针干预增加了二者的表达。  结论  电针对失重性骨骼肌萎缩具有对抗作用,该作用部分是通过激活IGF-I/Akt/Foxo3a/Atrogin-1和MuRF-1信号途径实现的。预防电针和同步电针干预方法在改善失重性骨骼肌萎缩方面未显示差异。
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