慢性酒精中毒性肌病一氧化氮合酶与抗氧化状态关系的研究

来源 :大连医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:gaolch013
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慢性酒精中毒性肌病(Chronic alcoholic myopathy,CAM)在西方国家是最常见的肌病之一,国外有资料显示大约30%~60%的长期饮酒者产生此病。随着我国人民生活水平的提高,近年国内酒精中毒患者有增多趋势,但对酒精中毒性肌病仅有少数临床报道,对此病发病机制的研究基本是空白。与遗传性肌病相比,酒精性肌病是唯一可治疗干预的肌病,其细胞和分子水平的研究对其他代谢性肌病的研究有一定参考价值。国外学者在肌营养不良症和包涵体肌病的研究中发现,一氧化氮合酶(Nitric oxide synthase,NOS)与氧化应激(Oxidative stress)可诱导肌萎缩的发生,且二者具有一定的相关性。NOS的活性在CAM中是否有变化,与CAM肌萎缩的发生有无相关性, NOS引起的骨胳肌氧化-抗氧化平衡失调是否为发病机理中的重要环节,国内外均尚未见报道。因此,在CAM患者日益增加的今天,对于该病发病机制的深入研究具有重要的社会意义。目的:本实验旨在利用大鼠慢性酒精中毒性肌病模型检测骨骼肌中NOS的表达情况,以及氧化-抗氧化状态的变化。比较分析慢性酒精中毒性肌病中的氧化-抗氧化状态和一氧化氮合酶的改变特征,进一步地探讨该病发病机制,为CAM的防治提供理论依据。方法:(1)建立慢性酒精中毒性大鼠肌病模型,观察大鼠体重、肌肉湿重、胫骨长度及湿重、和肌肉组织病理改变。(2)实验组用含饲料总能量36%的酒精给大鼠灌胃,对照组用含与酒精热量相等的蔗糖灌胃,两组均喂饲改良的全营养高脂饲料,于10周后,取后肢肌肉,在分离出腓肠肌、比目鱼肌、跖肌后,将各类肌肉均分别地制备成冰冻切片和肌组织匀浆,经组织化学染色确认成模后采用免疫组化方法检测nNOS和iNOS的表达;采用免疫荧光法检测nNOS的表达;采用分
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