钙拮抗剂三氟拉嗪对兔耳增生性瘢痕作用的研究

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背景:增生性瘢痕的常规治疗方法,包括手术,类固醇激素,抗代谢药,免疫抑制剂和放射治疗,最有可能的重复发作或更严重的反应这限制了它的使用在临床领域。现在采取钙拮抗剂对增生性瘢痕进行治疗已有较大的发展。该实验中,是为了测试对增生性瘢痕,三氟拉嗪是否可以成为选择的药物。目的:应用兔耳增生性瘢痕模型制定恰当的实验设计。然后通过组织染色,电子显微镜以及相关因子检测的方法,对兔耳增生性瘢痕进行研究。研究三氟拉嗪影响瘢痕形成相关因素,然后在理论和实验的基础上,解释三氟拉嗪能够成为治疗增生性瘢痕的可选药物。方法:选择成年,身体健康的兔子24只,要求耳腹部无外伤,无异常斑块,喂养观察1周,无异常,参照参照Morris等,李荟元等以及朱桂英建立兔耳增生性瘢痕模型的方法建立兔耳瘢痕模型。为了提高准备手术瘢痕模型的成功率,严格遵守无菌操作规程,进行操作。每单耳进行6创口制备,共288个创口。待30天后,兔耳瘢痕形成后,随机分为三组,三氟拉嗪作为试验药物组,曲安奈德作为阳性对照组,生理盐水作为对照组。分组分次在基底部和瘢痕病变局部注射。以注射50μl/伤口的量注射一次,每3天一次,共6次.稀释浓度上三氟拉嗪和曲安奈德应该是相同的,以保证在实验变量的统一,是1μg/μl。之后将瘢痕组织,以苦味酸品红(VG)苏木精-伊红染色(HE)染色瘢痕组织,观察瘢痕组织中胶原纤维、成纤维细胞的形态数量。由于PCNA和TGF-β1因子和瘢痕形成相关,所以通过ELISA对瘢痕组织中PCNA的和TGF-β1的浓度水平进行了测量。用于辅助证明三氟拉嗪对兔耳增生性瘢痕可行性的治疗效果。结果:1.HE染色示三氟拉嗪组与曲安奈德组成纤维细胞相对较少,而空白组成纤维细胞相对较多,三氟拉嗪组中成纤维细胞数量水平低于空白对照组,与曲安奈德组无明显差异;2.VG染色示三氟拉嗪组与曲安奈德组胶原纤维相对较为稀疏整齐,而空白组胶原纤维相对较为密集紊乱,三氟拉嗪组较空白对照组整齐,与曲安奈德组无明显差异。3.ELISA法检测显示三氟拉嗪能抑制TGF-β1及PCNA表达效果。结论:三氟拉嗪通过抑制和纤维细胞的分泌TGF-β1(P<0.05)能力并抑制成纤维细胞的过度增值,表现为PCNA含量降低(P<0.05),降低了瘢痕组织中TGF-β1的水平,并减少了胶原蛋白合成和积累,对瘢痕形成之初和形成之后两个方面进行调节,以达到抑制过度形成瘢痕组织的目的。为治疗因增生性瘢痕引起的疾病指出了一个方向,为临床使用三氟治疗增生性瘢痕提供了实验支持。
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