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目的：1.探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)对HT-29细胞和HCT-8细胞所形成肿瘤生长和分化的影响。2.研究BMSCs微环境对于HT-29细胞发生EMT及其相关pre-mRNA选择性剪接的影响,分析相关剪接因子在其中表达水平的改变。3.探索PTB基因对于HT-29细胞生物学行为的调控。方法：1.体内实验：将裸鼠分为BMSCs组、HT-29组、BMSCs+HT-29组、HCT-8组和HCT-8+BMSCs组。分别将相应细胞悬液注射到裸鼠皮下,测量形成肿瘤体积,7周后取材、称重并进行HE染色；Realtime RT-PCR和免疫组织化学染色检测上皮标志基因E-CADHERIN表达水平2.体外隔离共培养实验：采用Transwell隔离共培养小室将HT-29细胞与BMSCs进行隔离共培养,观察HT-29细胞形态改变,RT-PCR检测EMT相关基因表达以及FGFR2、CD44和ENAH的选择性剪接方式,同时检测FGFR2剪接调控因子的表达水平。3.PTB基因敲减实验：HT-29细胞中将PTB基因敲减后检测EMT相关基因的表达以及FGFR2、CD44和ENAH的选择性剪接方式。结果：1.体内实验中,BMSCs组未见肿瘤形成,HT-29+BMSCs组形成肿瘤质量和体积与HT-29组无明显差异,但肿瘤分化水平更低,且E-CADHERIN表达水平更低。HCT-8+BMSCs且形成肿块质量和体积与HCT-8组亦无明显差异,且肿瘤分化程度亦差异不明显,但均明显低于HT-29组和HT-29+BMSCs组。2.与BMSCs体外隔离共培养后HT-29细胞形态发生EMT样改变,EMT相关基因表达水平亦发生相应改变,同时FGFR2、CD44和ENAH由上皮特异性剪接方式转变为间充质特异性剪接方式。参与FGFR2pre-mRNA选择性剪接的基因TIA1、TIAL1、ESRP1、ESRP2、hnRNPM、hnRNPH, hnRNPF、ASF/SF2、RBM38、PTB和C-MYC表达下调,而FOX2、MRG15和hnRNPA1表达水平无明显改变。3.HT-29细胞在敲减PTB基因后,形态上可见其失去部分上皮细胞特征,FGFR2、CD44和ENAH剪接方式发生相应改变,同时上皮标志基因E-CADHERIN表达下调,ESRP1和ESRP2表达水平平明显下调,但间充质细胞特异基因VIMENTIN表达未发生明显上调,三个重要的EMT的调控因子SNAIL、SLUG和TWIST表达水平无明显增加,MRGI5表达水平亦无明显改变。结论：1.三倍数目的BMSCs没有明显改变HT-29细胞和HCT-8细胞所形成肿瘤的体积和质量,但BMSCs的存在使HT-29细胞形成肿瘤分化水平更低。2. BMSCs微环境能诱导HT-29细胞发生EMT,影响HT-29细胞重要剪接因子的表达,并引起FGFR2、CD44和ENAH剪接方式的改变。3.PTB可能通过对于ESRP1和ESRP2的调控来维持HT-29细胞上皮特征。