论文部分内容阅读
肉鸡肺动脉高压综合征(pulmonary hypertension syndrome，PHS)，又称肉鸡腹水综合征(ascites syndrome，AS)，是发生于快速生长的商品代肉鸡的一种营养代谢性疾病。全世界每年约有4％的肉鸡死于PHS，造成高达10亿美元的经济损失：我国PHS发病率平均为4.5％，每年造成的经济损失约为4.68亿美元。在多数情况下，快速生长和环境低温是引起商品肉鸡发生PHS的主要原因，这两种因素均能造成机体代谢需氧增加，并促使心输出量增多。当PHS易感鸡相对缺乏弹性的肺血管不能容纳快速增多的心输出量，或肺血管病理性收缩造成血液通过肺血管的阻力升高时，则导致肺动脉压升高。持续的肺动脉高压引起机体发生一系列病理生理改变，包括全身性组织低氧、肺血管重构、右心衰竭、肝门脉高压和腹水，最终形成PHS，但其发生机制尚不完全明了。本研究从肺动脉高压肉鸡肺动脉蛋白激酶Cα(PKCα)、一氧化氮合酶(NOS)活性及细胞凋亡等变化入手，进一步研究PHS的发病机制，并寻求不同的防治手段和方法。 试验Ⅰ 蛋白激酶Ca(PKCα)与肺血管重构。采用环境低温复制肉鸡PHS模型，观察肺动脉高压肉鸡肺动脉蛋白激酶Cα(PKCα)的表达及其与肺血管重构的关系。160羽艾维茵-2000商品代肉鸡，按常规方法育雏，于14d时随机分为常温对照组(NT组)和低温组(LT组)，每组各80羽。自14d起，LT组舍内温度从28℃以每天1～2℃的速度下降，至21d降至14～12℃，并维持到试验结束。NT组仍继续按常规饲养(21d起舍温控制在20℃)。记录肺动脉高压综合征(PHS)发病率，并分别于24、32、39和45d从各组随机抽样，测定右心室／全心室(RV／TV)、红细胞压积(PCV)和血红蛋白(Hb)；采用计算机病理图像分析手段，检测肺动脉管壁面积／管总面积(WA／TA)、平均中膜厚度(mMTPA)；采用免疫组化方法结合微机图像分析技术，检测肺小动脉光密度值(OD)，以OD值代表PKCα的表达。结果表明：LT组肉鸡PHS发病率较NT组显著升高(P＜0.05)，RV／TV值在45d时升高(P＜0.05)，PCV和Hb值在32d后升高(P＜0.05)，mMTPA值和WA／TA值显著升高(P＜0.05)，PKCα表达增强，且PKCα表达与mMTPA值和WA／TA之间呈显著正相关。博士学位论文:肺动脉高压肉鸡肺动脉PKCa、NOS和细胞凋亡变化的研究 试验nL一精氨酸(L一Arg)对肺动脉一氧化氮合酶(NOS)活性的影响.240羽艾维菌一2000商品代肉鸡，按常规方法育雏，于14d时随机分为常温对照组(NT组)，低温组(LT组)和低温加L一Arg组(LA组)，每组各80羽.自14d起，LT和LA组舍内温度从28℃以每天l一2℃的速度下降，至Zld降至14一12℃，并维持到试验结束.NT组仍继续按常规饲养(Zld起舍温控制在20℃)。此外，LA组自14d起在饲料中按109·kg一，剂量添加L一Arg，直至试验结束.记录肺动脉高压综合征(PHS)发病率，并分别于24、32、39和45d从各组随机抽样，测定右心室/全心室(RV/TV)和血浆一氧化氮(NO)水平.肺组织切片经卜NADPH一d组织化学染色后，采用病理图像分析软件检测直径在100一200拼m的肺小动脉光密度(oD)值，以OD值代表肺动脉NOS活性.结果显示:LT组肉鸡PHS发病率较NT组显著升高(P<0.05)，LA组与NT组相比无显著差异(尸>0.05)，但显著低于LT组(P<0.05);LT组肉鸡RV/TV在45d时较NT组显著升高(P<0.05)，而LA组肉鸡RV汀v值与NT组和LT组相比均无显著差异(尸>0.05);LT组肉鸡血浆NO浓度总体上与NT组差异不显著(尸>0.05)，仅在39d时降低(P<0.05)，而LA组血装NO浓度自32d时起较NT和LT组显著升高(P<0.05);LT组肉鸡肺动脉OD值显著低于NT组(P<0.05)，而LA组肺动脉OD值在32和39d时较LT组显著升高(P<0.05)，并自32d时起达到NT组水平(P>0 .05)0 试验mL一精氛酸(L一Arg)对肺血管重构的影响.240羽艾维菌一2000商品代肉鸡，按常规方法育雏，于14d时随机分为常温对照组(NT组)，低温组(LT组)和低温加L一Arg组(LA)，每组各80羽。自14d起，LT和LA组舍内温度从28℃以每天1一2℃的速度下降，至Zld降至14一12℃，并维持到试验结束.NT组仍继续按常规饲养(Zld起舍温控制在20℃).此外，LA组自14d起在饲料中按109·kg一，剂量添加L一Arg，直至试验结束.记录肺动脉高压综合征(PHS)发病率，并分别于24、32、39和45d从各组随机抽样，测定右心室/全心室(RV厅V)和血浆一氧化氮(NO)水平。采用计算机病理图像分析软件测定肺动脉管壁面积/管总面积认叭/TA和平均中膜厚度(mMT队)，并用原位缺口末端标记法(T uNEL法)对肺动脉凋亡平滑肌细胞进行染色和计数，计算凋亡细胞百分率;采用免疫组化方法和病理图像分析软件，检测肺小动脉光密度值(OD)，以oD值代表蛋白激酶ca(PKca)的表达。结果:LT组肉鸡PHS发病率升高(P<0.05)，其Rv/Tv值在45d时升高(P<0.05)，而LA组PHS发病率和RV汀V值与NT组相比均无显著差异(尸>0.05);LT组肉鸡肺血管mMTPA值和场叭/TA值较NT组升高(P<0.05)，而LA组mMT队与NT组相比差异不显著(P>O刃5)，其场叭/TA值仅在45d时升高(P<0.05); LA组mMTPA值和场叭八人值与摘要LT组相比呈下降趋势，并在32d时显著降低(P<0.05);LT组血浆NO浓度总体上与NT组差异不显著(尸>0.05)，仅在39d时降低(P<0.05); LA组血装NO浓度?