【摘 要】
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光合细菌Thiorhodovibrio sp.970属于光合细菌中的着色杆菌科,其捕光蛋白复合体（LHI-RC）在970 nm附近有最大吸收峰,是目前含有细菌叶绿素a的光合细菌中红移最大的;且Thiorhodovibrio sp.970的捕光蛋白LHI除了表现出常见的pufBALMC基因序列外,在pufC下游还含有第二个pufBA基因序列。光合细菌Rhodospirillum rubrum（R.r
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光合细菌Thiorhodovibrio sp.970属于光合细菌中的着色杆菌科,其捕光蛋白复合体（LHI-RC）在970 nm附近有最大吸收峰,是目前含有细菌叶绿素a的光合细菌中红移最大的;且Thiorhodovibrio sp.970的捕光蛋白LHI除了表现出常见的pufBALMC基因序列外,在pufC下游还含有第二个pufBA基因序列。光合细菌Rhodospirillum rubrum（R.rubrum）是紫色非硫化兼性厌氧菌,R.rubrumH2是R.rubrum的突变菌株,自身不能独立形成胞质内膜（ICM）,但在外源基因的刺激下能产生ICM并包裹外源蛋白使其在ICM上表达。因此,本研究将对Thiorhodovibrio sp.970菌株中编码LHI的两个pufBA基因分别在R.rubrumH2中进行异源表达,并观察其特征吸收峰的变化。本课题对Thiorhodovibrio sp.970捕光蛋白LHI异源表达进行研究,利用分子生物学原理将Thiorhodovibrio sp.970捕光蛋白LHI的pufB1A1和pufB2A2进行体外克隆,通过基因重组技术来构建pPUCTerm-pufB1A1和pPUCTerm-pufB2A2重组表达载体,通过E.coli WM3064的结合转化,将成功构建的表达载体转化到R.rubrumH2中,使用PCR和SDS-PAGE鉴定pufB1A1和pufB2A2基因是否成功在R.rubrumH2中表达,并对重组菌进行光谱检测,测定其特征吸收峰。结果表明:重组表达载体pPUCTerm-pufB1A1和pPUCTerm-pufB2A2均成功构建,且pufB1A1和pufB2A2基因在R.rubrumH2中成功表达,光谱检测重组菌的特征吸收峰均在970 nm处出现,实验结果证明,pufB1A1和pufB2A2能够单独在R.rubrumH2中进行异源表达,且在970 nm处均出现特征吸收峰。光合细菌Thiorhodovibrio.sp.970中捕光蛋白LHI异源表达的成功,有助于对其捕光蛋白LHI的编码基因中与Ca2+结合的氨基酸突变体进行研究,同时为进一步研究捕光蛋白LHI结构以及光谱吸收奠定基础。
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