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肺癌是目前全球发病率和死亡率均位于前列的恶性肿瘤,主要病理类型以非小细胞肺癌(NSCLC)为主。NSCLC的治疗包括外科手术治疗,放化疗,靶向治疗以及免疫治疗等手段。尽管诊疗技术不断发展,NSCLC的总体生存仍然不容乐观,5年生存率约在16%左右。RNA结合蛋白(RNA Binding Proteins,RBPs)在基因调控过程中扮演着关键作用,Musashi(MSI)家族是一类进化保守的RNA结合蛋白,Musashi-2(MSI2)是其中一员,近年来研究发现,MSI2正在成为与癌症发生,进展和耐药等多个关键生物过程相关的调节因子,在许多癌症类型中过表达并且和预后等相关,而目前关于MSI2在NSCLC中的相关研究仍然较少。本课题分三部分,对MSI2基因在不同类型NSCLC中的表达及其对肿瘤功能的影响进行了研究,进一步丰富了MSI2的功能,为MSI2作为NSCLC的预后及治疗潜在靶点提供一定的理论依据。在第一部分,我们运用免疫组化方法,对不同类型NSCLC的肿瘤组织进行了分析,并结合公共数据库,发现MSI2在NSCLC肿瘤组织中存在异常表达增高且和病理类型相关,可能参与肺癌的定向分化及转分化。在第二部分,我们选取多种不同类型的NSCLC细胞株,利用Western Blot检测MSI2蛋白表达水平,并选择其中四种细胞系,通过慢病毒成功构建了A549、H460、PC-9、H226的稳定MSI2过表达模型,以及A549和PC-9稳定MSI2敲减细胞模型,并通过RTqPCR、Western Blot进行了验证。在第三部分,我们利用已构建的过表达及敲减细胞模型,研究不同类型的NSCLC中,MSI2对于细胞增殖、侵袭、转移和克隆形成等方面的影响,发现MSI2在EGFR突变的NSCLC细胞株PC-9中有着明显区别于其他类型的功能。接着,我们在A549和PC-9细胞中进行了药敏实验,发现A549中MSI2的过表达可降低其对化疗药物顺铂和培美曲塞的敏感性;而在PC-9中,MSI2过表达则会提高其对化疗药物顺铂和培美曲塞,以及靶向药吉非替尼的敏感性。此外,我们将四种细胞的过表达及其对照细胞的全RNA进行了深度测序,包括mRNA和lncRNA,同时利用四种细胞进行了免疫共沉淀实验,并将共沉淀蛋白成分进行质谱分析,结合测序和质谱结果,进一步探究MSI2潜在的上下游通路和作用位点。因此,我们研究结果提示:MSI2在不同类型的NSCLC中存在异常高表达,MSI2表达水平的改变会对肿瘤细胞的功能及药物敏感性产生影响,并且MSI2在肿瘤中的功能可能和NSCLC的EGFR基因型有潜在的关联。