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骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)是来源于骨髓基质的一类具有高度自我更新能力和多向分化潜能的成体干细胞，能够诱导分化为脂肪细胞、肌细胞、神经细胞和骨细胞等多种终末细胞。为探讨猪骨髓MSCs的分离培养及其向脂肪细胞和肌细胞的诱导分化方法，本试验选择5-7日龄长白仔猪，采用percoll密度梯度离心法，从猪的骨髓分离纯化MSCs，采用免疫荧光染色和流式细胞术对骨髓MSCs进行鉴定，并观察细胞的增殖特点。分别采用四种成脂诱导方法(胰岛素+地塞米松，胰岛素+地塞米松+油酸+辛酸，胰岛素+地塞米松+吲哚美辛，胰岛素+地塞米松+吲哚美辛+1-甲基-3-异丁基黄嘌呤)和两种成肌诱导方法(5-氮杂胞苷+马血清，地塞米松+氢化可的松+马血清)进行处理，观察并比较了不同方法诱导猪骨髓MSCs成脂成肌分化的特点，并采用荧光定量PCR检测了猪骨髓MSCs在成脂和成肌分化过程中相关基因mRNA的表达模式。
研究结果表明：
(1)采用percoll密度梯度离心法获得的猪骨髓MSCs在接种后5h开始贴壁，大约8d可长成单层，细胞大多呈典型的长梭形，部分呈三角或多角形，细胞聚集呈漩涡样生长。
(2)免疫荧光染色和流式细胞术的检测结果表明，获得的猪骨髓MSCs能够表达MSCs的表面标志CD29和CD44，而不表达CD31和CD45，符合骨髓MSCs的特性。
(3)用含不同浓度血清(10％、15%和20%)的培养液对猪骨髓MSCs进行培养，发现细胞有较强的增殖能力，且高浓度血清组细胞增殖能力最强。
(4)采用四种成脂诱导方法都能诱导猪骨髓MSCs分化为脂肪细胞，不同的诱导方法其效果不同，但脂肪细胞生成相关基因的变化趋势大体一致；其中在胰岛素、地塞米松的基础上添加油酸和辛酸，成脂启动时间最早。
(5)采用两种成肌诱导方法都能诱导猪骨髓MSCs分化为肌细胞，不同诱导方法处理后肌细胞生成相关基因的变化趋势大体一致，且表达量相当。