本文以凡纳滨对虾为研究对象，探讨了一氧化氮合酶(Nitric Oxide Synthase，NOS)在凡纳滨对虾几个重要组织中的分布，进一步研究了溶藻弧菌感染、亚硝酸氮胁迫和低溶氧三种胁迫条件对凡纳滨对虾体内氧自由基一氧化氮(Nitric Oxide，NO)系统的影响以及胁迫后对虾肝胰脏组织的组织病理变化，期望为对虾健康和无公害养殖提供理论依据。 主要实验工作及结果如下： 1、通过NADPH-d组化染色发现，凡纳滨对虾的中肠、肌肉和复眼的NOS阳性反应较弱，而鳃、胃和肝胰脏组织的阳性反应相对较强，其中又以肝胰脏组织的阳性反应最强烈，阳性细胞胞浆内含蓝色或深蓝色颗粒，核不染色。这说明凡纳滨对虾在健康无刺激状态下，中肠、肌肉和复眼中含NOS极少，而鳃、胃和肝胰脏组织中含有较多的NOS。 2、为了研究感染溶藻弧菌对凡纳滨对虾体内NO氧自由基的影响，分别对凡纳滨对虾注射浓度为1×10<5>cfu/ml、1×10<6>cfu/ml、1×10<7>cfu/ml的溶藻弧菌悬液，在注射后4h、12h、24h、48h、72h和120h取对虾肝胰脏组织，测定该组织匀浆中NO、NOS、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)活力及含量的变化。结果表明注射溶藻弧菌后，凡纳滨对虾肝胰脏组织中NOS和SOD活力均被诱导，明显高于对照组，在12h时，酶活力均达到最大值，与对照组相比，差异显著(P<0.05)。随着感染时间的延长，NOS和SOD活力逐渐下降，而NO和MDA含量有所升高，说明对虾体内的氧自由基NO系统在抗菌杀菌过程中起到重要的作用。用有明显病理症状的对虾肝胰脏组织进行常规石蜡切片和HE染色，在光学显微镜下进行观察发现，感染了溶藻弧菌的凡纳滨对虾肝胰脏组织出现明显的炎症反应，变性，坏死灶形成结节。 3、分别用浓度为0.1mg/L、0/5mg/L、1mg/L的亚硝酸氮胁迫凡纳滨对虾，在胁迫后0d、2d、4d、6d、8d取对虾肝胰脏组织为实验样品。胁迫第2d、4d，NOS和SOD活力均有所升高，与对照组相比，差异显著(P<0.05)，其产生的少量NO氧自由基能提高对虾的抗不良环境能力；长时间的高浓度亚硝酸氮胁迫能使NOS和SOD活力降低，且水体中亚硝酸氮浓度越高，自由基在凡纳滨对虾体内导致的损伤就越严重。取有明显中毒症状的对虾肝胰脏组织进行常规组织病理切片，在光学显微镜下进行观察发现，肝胰脏组织出现从细胞肿胀到空泡化、坏死等一系列组织病理学变化。 4、本课题还研究了水体低溶氧量条件下凡纳滨对虾体内NO及氧自由基受到的影响。通过密封水体使凡纳滨对虾处于缺氧状态，测定不同溶氧量时凡纳滨对虾肝胰脏组织中NOS、NO、SOD、MDA的活力及含量变化情况。结果表明，当溶氧量高于2mg/L时，凡纳滨对虾肝胰脏组织中NOS和SOD活力较高，并且均保持上升的趋势，NO和MDA含量亦有所升高；当溶氧量越来越低时，NOS和SOD活力开始下降，NO也有所下降，而MDA却保持上升的趋势。说明低氧会导致自由基的变化，从而引发对虾的严重损伤。另一方面，也说明了NO在缺氧过程中能对对虾机体起到一定的保护作用。经组织病理切片发现，严重缺氧的凡纳滨对虾肝胰脏组织肝小管遭到破坏，部分肝细胞变得扁平，变形。