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【目的】：通过培养不同代次兔髓核细胞，检测其Ⅱ型胶原和SOX9的含量变化，观察其细胞生长规律，从而寻找出生物学性状最佳的细胞代次作种子细胞。【方法】：取2-3月龄新西兰大白兔8只，空气栓塞致死后在无菌条件下取出胸、腰椎段髓核，髓核组织以0.2%Ⅱ型胶原酶充分消化后进行细胞传代培养。将原代细胞作为对照组（A组，n=8）,传代后的2、3、4、5代细胞分别为B、C、D、E组，倒置相差显微镜下观察不同代次兔髓核细胞的形态变化，采用MTT法检测细胞OD值，绘制细胞生长曲线；RT-PCR和免疫组化法检测不同代次细胞Ⅱ型胶原和SOX9的表达。【结果】：原代细胞（A组）生长缓慢，梭形为主，20-30天达80%融合可传代；B组生长速度最快，7-10天可达80%融合传代，C、D、E组髓核细胞生长速度依次减慢，细胞形态不规则。 RT-PCR和免疫组化法检测可知A组和B组Ⅱ型胶原及SOX9的表达明显高于C、D、E三组（P <0.05），A、B组之间无显著性差异（P>0.05）,C、D、E组之间无显著性差异（P>0.05）。【结论】：不同代次兔髓核细胞的生长规律、Ⅱ型胶原及SOX9含量不同，第二代兔髓核细胞生物学特性与原代细胞相似，可作为种子细胞进行实验研究。