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目的:观察TSC2基因在人肝癌HepG2细胞中的表达,并对影响其表达的机制进行初步探讨方法:1、不同工作浓度(0、0.4μmol/L、1.6μmol/L、6.4μmol/L、25.6μmol/L和102.4μmol/L)5-Aza-CdR[1]作用HepG2细胞,应用MTT法测不同时间(24、48、72h)细胞的增殖抑制率;2、应用RT-PCR和Western blotting测5-Aza-CdR作用于HepG2细胞后的TSC2mRNA和tuberin蛋白的表达;3、甲基化特异性PCR分别检测未经5-Aza-CdR处理和经用5-Aza-CdR处理的两组肝癌细胞HepG2中TSC2基因组启动子甲基化状态。结果:1、MTT法测得:5-Aza-CdR可明显抑制人肝癌细胞HepG2增殖,在终浓度为0.4μmol/L、1.6μmol/L、6.4μmol/L、25.6μmol/L和102.4μmol/L的5-Aza-CdR作用人肝癌HepG2细胞72小时后,抑制率分别为(40.14±2.11)%、(48.72±3.21)%、(56.66±2.43)%、(62.24±2.43)%和(70.10±3.12)%;终浓度为102.4μmol/L的5-Aza-CdR作用人肝癌HepG2细胞24、48、72小时后抑制率分别为(62.90±2.14)%、(67.52±2.05)%和(70.10±3.12)%;呈现时间及剂量依赖性(P <0.05);2、不同浓度5-Aza-CdR作用于HepG2细胞培养72小时后发现,随着浓度的增加TSC2mRNA的表达增加(P<0.05), tuberin的表达亦增加(P<0.05);3、MSP法测得未经5-Aza-CdR处理的肝癌细胞HepG2中TSC2基因甲基化与非甲基化共存,并且甲基化程度明显高于非甲基化;加用去甲基化药物5-Aza-CdR组甲基化程度明显下降;结论:TSC2作为一种抑癌基因,在HepG2细胞中表达下降,其机制可能是TSC2基因启动子区高甲基化状态所致。