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目的:构建人胃癌细胞株MGC-803裸鼠足垫淋巴结移植模型,建立高转移性胃癌细胞株MGC-803-L,并初步探讨其生物学行为以及侵袭、转移机制相关研究。方法:1.将处于对数期人胃癌细胞株MGC-803常规消化并制成单细胞悬液,随机选取12只裸鼠于足垫皮下注射细胞悬液,观察裸鼠足垫成瘤情况。2.待裸鼠饲养6周后,处死裸鼠,取同侧腘窝或腹股沟淋巴结进行病理切片及免疫组化检测,找出有癌细胞转移的淋巴结。若未找到癌转移的淋巴结,则重复上述实验,延长饲养时间,直至证实胃癌淋巴结转移率≥70%时止。3.将证实为癌转移的淋巴结切成微小组织块,提取原代细胞,进行原代细胞培养,最终鉴定并成功建立稳定遗传高转移性胃癌细胞株MGC-803(MGC-803-L)。4.利用短串联重复序列(short tandem repeat,STR)细胞分型技术对MGC-803-L进行检测。5.应用CCK-8试剂盒,流式细胞仪,Transwell小室及涂有Matrigel胶的Transwell小室等,对比MGC-803与MGC-803-L之间的生物学行为差异。6.应用实时荧光定量PCR检测氯离子通道蛋1(Chloride intracellular channel 1,CLIC1),整合素(Itergirns,ITGs)(α1、α3、αv、β1)等相关基因的表达情况;应用Western blot实验对比MGC-803与MGC-803-L之间CLIC1蛋白表达情况;应用免疫组化对比移植瘤与转移性淋巴结之间CLIC1蛋白表达情况。结果:1.人胃癌细胞株MGC-803注射裸鼠足垫后,1周后可见到大部分裸鼠足垫移植瘤生长,2周裸鼠足垫均见移植瘤生长,成瘤率100%。2.HE染色病理证实腘窝、腹股沟淋巴结有不同程度癌细胞转移;免疫组化染色结果提示CK-pan染色强阳性,进一步证实癌细胞淋巴结转移。结合两者结果,裸鼠腘窝、腹股沟淋巴结转移率分别为75.00%(9/12)、41.67%(5/12)。3.取转移性淋巴结提取原代细胞培养,成功建立MGC-803-L。4.STR数据结果表明MGC-803-L与亲本细胞株MGC-803来源一致(匹配度为90.7%),可用于后续实验。5.除0h两组细胞增殖率差异无统计学意义外(P>0.05),两组细胞MGC-803与MGC-803-L在24h、48h、72h的相对增殖率分别为(42.62%±0.03)(60.18%±0.07)、(75.80%±0.08)(107.12%±0.09)、(136.26%±0.03)(164.18%±0.11),MGC-803-L组24h、48h、72h增殖率均比MGC-803组高(P<0.05);MGC-803组与MGC-803-L组细胞的凋亡率分别为(12.27%±4.84)(12.45%±2.36),差异无统计学意义(P>0.05);MGC-803组与MGC-803-L组穿过Matrigel胶的Transwell小室细胞个数分别为(108.00±11.87)(214.20±13.75),MGC-803-L组细胞侵袭力显著比MGC-803组高(P<0.01);MGC-803组与MGC-803-L的Transwell小室细胞个数分别为(232.40±22.36)(437.00±31.25),MGC-803-L组细胞迁移能力显著比MGC-803组高(P<0.01)。6.MGC-803-L组对MGC-803组CLIC1mRNA的相对表达量为(1.66±0.19),MGC-803-L组较MGC-803组CLIC1mRNA的相对表达量升高(P<0.05);MGC-803-L组对MGC-803组ITG(α1、α3、αv、β1)mRNA的相对表达量分别为(2.51±0.86)(1.47±0.19)(1.38±0.23)(1.19±0.08),MGC-803-L组较MGC-803组ITG(α1、α3、αv、β1)mRNA表达升高(P<0.05);转移性淋巴结组与移植瘤组免疫组化中CLIC1蛋白的相对表达量为(0.499±0.046)(0.226±0.091),转移性淋巴结组较移植瘤组CLIC1蛋白的相对表达量升高(P<0.05);MGC-803-L组与MGC-803组中CLIC1蛋白的相对表达量分别为(0.647±0.138)(0.907±0.078),MGC-803-L组对MGC-803组CLIC1蛋白的相对表达量升高(P<0.05)。结论:成功构建人胃癌细胞株MGC-803裸鼠足垫移植瘤模型,该模型成瘤率、转移率高,并成功建立稳定遗传的高转移性胃癌细胞株MGC-803-L。该细胞株的获取,为进一步深入探究胃癌侵袭、转移机制奠定良好的基础。此外,在此基础上,本研究初步证实了CLIC1升高与胃癌的转移能力增强有关,且可能与ITGα1、ITGα3、ITGαv、ITGβ1基因发生差异性表达有关。