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第一部分抗Lingo-1抗体对抑郁症伴认知障碍大鼠行为学的作用目的以慢性不可预知性应激(Chronic Unpredictable Stress,CUS)抑郁模型伴认知障碍大鼠为研究对象,运用Morris水迷宫等方法研究抗Lingo-1抗体对抑郁症伴认知障碍大鼠行为学的作用,以期为改善抑郁症的认知障碍提供新的治疗手段。方法4-6周清洁级雄性Sprague Dawley(SD)大鼠适应性喂养1周后,随机分为对照组(10只)和模型组(60只),建立CUS抑郁症模型,为期4周。利用糖水偏好试验筛选出成模大鼠(23只),随机分为 CUS 组(12 只)及 Anti-Lingo-1 组(11 只)。Anti-Lingo-1 组每周给予8mg/kg抗Lingo-1抗体治疗3周。在整个实验过程中,对照组大鼠于正常环境下饲养,除行为学测试外,均为5只/笼;CUS组及Anti-Lingo-1组大鼠为孤笼喂养模式。每周同一时间称取各组大鼠的体质量,每周同一时间对各组大鼠进行糖水偏好测试以评价大鼠的快感缺失水平。为期3周的抗Lingo-1抗体治疗结束后,运用Morris水迷宫试验、旷场试验和新环境进食抑制试验评估对照组,CUS组和Anti-Lingo-1组的行为学水平。结果1、体质量:在基线调整后,第四周CUS组的体质量显著低于对照组体质量(P=0.000)。在抗Lingo-1抗体治疗3周后,对照组体质量、CUS组体质量和Anti-Lingo-1组体质量有显著差异(P=0.000),但CUS组和Anti-Lingo-1组的体质量没有显著差异(P=0.130)。2、糖水偏好测试:第四周糖水偏好试验中CUS组糖水消耗百分比显著低于对照组糖水消耗百分比(P=0.000)。在抗Lingo-1抗体处理3周后,对照组糖水消耗百分比、CUS组糖水消耗百分比和Anti-Lingo-1组糖水消耗百分比之间有显著差异(P=0.001),但CUS组和Anti-Lingo-1组糖水消耗百分比之间没有显著差异(P=0.687)。3、Morris水迷宫;抗Lingo-1抗体治疗3周后,在前五天定位航行试验中三组之间没有显著差异(P=0.966)。在Morris水迷宫测试的第六天空间探索试验,对照组穿越平台次数、CUS组穿越平台次数、Anti-Lingo-1组中穿越平台次数有显著差异(P=0.000),CUS组穿越平台次数显着低于对照组穿越平台次数(P=0.004),与CUS组相比,Anti-Lingo-1组中穿越平台次数显著增加(P=0.000)。对照组、CUS组和Anti-Lingo-1组大鼠在平台所在象限时间比较没有显著差异(P>0.05)。对照组、CUS组和Anti-Lingo-1组大鼠的平台所在象限路程百分比没有显著差异(P>0.05)。4、旷场试验:在旷场试验结果中,对照组、CUS组与Anti-Lingo-1组的旷场箱中央活动路程比有显著差异(P=0.008)。与对照组相比,CUS组的旷场箱中央活动路程比显著下降(P=0.002);与CUS组比较,Anti-Lingo-1组的旷场箱中央活动路程比没有显著差异(P>0.05)。5、新环境进食试验:在新环境进食抑制试验结果中,对照组、CUS组与Anti-Lingo-1组的食物消耗重量有显著差异(P=0.000)。与对照组相比,CUS组的食物消耗重量有显著下降(P=0.000);与CUS组比较,Anti-Lingo-1组的食物消耗重量没有显著差异(P>0.05)。对照组、CUS组与Anti-Lingo-1组的进食潜伏期有显著差异(P=0.000)。与对照组相比,CUS组的进食潜伏期有显著增加(P=0.000);与CUS组比较,Anti-Lingo-1组的进食潜伏期没有显著差异(P>0.05)。结论虽然3周的抗Lingo-1抗体治疗没有改善CUS抑郁症模型大鼠的抑郁样行为,但是显著改善了 Morris水迷宫检测的抑郁症大鼠的空间记忆能力。第二部分抗Lingo-1抗体对抑郁症伴认知障碍大鼠海马和白质体积以及海马内少突胶质细胞的定量研究目的抗Lingo-1抗体治疗被证实可以改善抑郁症大鼠的空间记忆能力,但其作用的细胞机制尚不明确。本研究主要探讨抗Lingo-1抗体对CUS抑郁症模型大鼠海马内少突胶质细胞的作用,为抗Lingo-1抗体改善抑郁症的空间记忆能力提供实验证据。方法第一部分行为学检测结束后,每组随机选取5只大鼠,麻醉后给予4%多聚甲醛经心脏灌注固定,分离出大脑组织。每只大鼠随机抽取一侧大脑半球,于梯度浓度的蔗糖水脱水,OCT包埋剂包埋后于冰冻切片机中沿冠状面切取60μm厚的连续切片,按照1/6的体视学抽样分数对大脑组织进行等距随机抽样,最终获得6组连续等距切片。随机抽取一组等距切片,进行苏木素染色,光学显微镜下运用细胞构筑法勾画白质和海马边界,并运用卡瓦列里原理对各组大鼠的白质和海马体积进行测算。再随机抽取一组含有海马的连续等距切片,对各组大鼠海马少突胶质细胞(CNPase:标记成熟阶段的少突胶质细胞)进行免疫组织化学染色,运用光学分合法分别对海马内DG和CAI、CA3区的CNPase+细胞进行计数。再随机抽取一组含有海马的连续等距切片,对各组大鼠海马髓鞘(MBP:髓鞘标记物)进行免疫荧光染色,分别对海马内DG和CA1、CA3区髓鞘的分布情况进行观察。结果1、白质体积:对照组、CUS组、Anti-Lingo-1组胼胝体体积有显著差异(P=0.039);与对照组比较,CUS组胼胝体体积显著减少(P=0.023);与CUS组比较,Anti-Lingo-1组胼胝体体积显著增加(P=0.030)。对照组、CUS组、Anti-Lingo-1组之间前联合体积没有显著差异(P>0.05)。对照组、CUS组、Anti-Lingo-1组胼胝体和前联合总体积有显著差异(P=0.045);与对照组比较,CUS组胼胝体和前联合总体积显著减少(P=0.025);与CUS组比较,Anti-Lingo-I组胼胝体和前联合总体积显著增加(P=0.036)。2、海马体积:对照组、CUS组、Anti-Lingo-1组之间的海马总体积没有显著差异(P>0.05)。对照组、CUS组、Anti-Lingo-I组之间海马CAI区的体积没有显著差异(P>0.05)。对照组、CUS组、Anti-Lingo-1组之间海马CA3区的体积没有显著差异(P>0.05)。对照组、CUS组、Anti-Lingo-1组之间的海马DG区体积没有显著差异(P>0.05)。3、三组大鼠海马内CNPase+细胞的体视学计数结果:在海马DG中,与对照组比较,CUS组CNPase+细胞数量显著减少(P=0.026);与CUS组比较,Anti-Lingo-1组CNPase+细胞数量显著增加(P=0.001)。在海马CA3区中,与对照组比较,CUS组CNPase+细胞数量显著减少(P=0.002);与CUS组相比,Anti-Lingo-1组CNPase+细胞数量显著增加(P=0.002)。在海马CA1区中,与对照组比较,CUS组CNPase+细胞数量没有显著差异(P>0.05);与CUS组相比,Anti-Lingo-1组CNPase+细胞没有显著差异(P>0.05)。4.海马MBP免疫荧光染色结果:免疫荧光染色结果显示,CUS组大鼠海马DG和CA1、CA3区中MBP的表达较对照组减少,染色较浅,髓鞘排列比对照组稀疏且模糊。用Lingo-1抗体处理后,Anti-Lingo-1组大鼠海马DG和CA1、CA3区中MBP表达较CUS的表达增加,染色明显,髓鞘排列密集且清晰。结论CUS抑郁症模型大鼠海马内存在成熟阶段少突胶质细胞数量的减少及髓鞘形成能力的下降。3周的抗Lingo-l抗体治疗可能是通过促进少突胶质细胞的分化及髓鞘形成来减轻抑郁症模型大鼠海马内少突胶质细胞的病理改变。抗Lingo-1抗体对海马内少突胶质细胞的积极作用可能是其对抑郁认知障碍治疗的重要细胞机制之一。