坛紫菜多糖超滤纯化与理化性质的研究

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坛紫菜是一种产于我国南方海区的重要经济海藻,也是提取坛紫菜多糖的主要来源。坛紫菜多糖属于半乳聚糖硫酸酯,是一种水溶性多糖,主要成分为半乳糖、3,6-内醚-L-半乳糖,还含有少量的鼠李糖、岩藻糖、阿拉伯糖等。大量研究表明,坛紫菜多糖具有抗肿瘤、抗疲劳、抗突变、抗氧化、抗病毒、降血脂、降血压等多种生物活性,且与硫酸根含量、多糖分子量的大小密切相关。本文对坛紫菜多糖的提取工艺、分离纯化、降解、降解多糖的体外抗氧化和抑菌实验进行了初步的探讨。本文选取购买于晋江的坛紫菜作为研究对象,将其烘干、粉碎、过80目筛。在浸提温度100℃,料液比1:20的条件下浸提5 h后,4000 r/min离心去沉淀,上清液在55℃加入0.1%的碱性蛋白酶处理3 h、4000 r/min离心去沉淀。最后得到的上清液直接冷冻干燥,多糖的提取率49.03%,其总糖含量为33.33%,硫酸根含量为19.25%,灰分含量为18.68%;而上清液醇沉后,多糖的提取率为35.77%,其总糖含量为43.65%,硫酸根含量15.29%,灰分含量为16.04%。结果表明,直接冷冻干燥制得的多糖的硫酸根含量要高于醇沉制得的多糖。运用截留分子量为50 kDa、30 kDa、10 kDa和5 kDa的超滤膜对冷冻干燥制得的坛紫菜多糖进行梯度超滤。结果发现,经截留分子量为50 kDa的超滤膜脱色,多糖的脱色率达到92.01%。分子量大于50 kDa的坛紫菜多糖占主要部分,高达61.15%,其中总糖含量为38.47%、硫酸根含量为21.60%。超滤截留制得的的坛紫菜多糖的水解试验。本文通过酸水解和氧化水解两种方式对坛紫菜多糖进行不同程度降解,发现两种水解方式都能使坛紫菜多糖得到降解,其中酸水解样品SP2和SP3相比其他降解的多糖产品,其硫酸根含量未出现明显下降,分别为(17.65±0.94)%和(19.78±0.77)%,其他降解样品SP4、SP5、SP6、SP7、SP8、SP9和SP10的硫酸根含量分别为(16.23±0.48)%、(15.74±0.44)%、(16.32±0.63)%、(15.16±0.35)%、(16.81±0.94)%、(14.45±0.21)%和(13.56±0.35)%,结果说明两种降解方式都能降低多糖的硫酸根含量。研究不同降解程度的坛紫菜多糖的抗氧化和抑菌性。研究结果发现,降解后的坛紫菜多糖同未降解的多糖相比,更能很好的促进羟自由基和DPPH的清除能力,也能提高样品的还原力。坛紫菜多糖和降解的多糖对不同的细菌和真菌的抑制实验表明,浓度为30mg/mL的多糖样品SP1、SP8、SP9和SP10对金黄色葡萄球菌的抑菌圈的直径分别为0 mm、15.37 mm、14.90 mm和12.23 mm,对其他菌的抑菌活性测定有待进一步深入研究。
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