前列腺干细胞抗原在前列腺组织中的表达

来源 :第二军医大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:junwen2009
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[背景] PSCA是最近发现的一个前列腺癌相关肿瘤抗原,因与SCA-2有30%同源性而得名,后者为Thy-1/Ly-6细胞表面抗原家族成员之一,其生理功能目前尚不清楚。PSCA有很高的前列腺组织特异性,其mRNA局限性表达在正常前列腺上皮的基底细胞层。文献报告,CaP组织中的80%~94%较正常前列腺组织表达增高,且在激素依赖与HIPCA之间无显著差异。骨转移灶中100%高表达且其表达水平较原发灶更高。但迄今为止,尚未见对各种前列腺组织的PSCA表达水平进行系统对照研究的报告。[目的] 本课题旨在利用ISH技术,检测PSCA mRNA在正常前列腺、BPH与CaP等三种典型前列腺组织中的表达水平,研究三者之间表达差异及其意义。为探讨PSCA在CaP临床诊断与免疫治疗方面的应用价值提供实验基础。[方法](1)根据Genebank提供的PSCA mRNA全长序列,设计并合成5’端及3’端引物。从高表达的CaP细胞株PC3细胞中抽提总RNA,采用RT-PCR的方法,克隆出PSCA基因编码框中部分片段(339bp/372bp),并装入pMD18-T克隆载体。转染JM109大肠杆菌,扩增后酶切、测序证实;(2)将目的基因片段转入含特异性SP6/T7 RNA聚合酶启动子序列的pcDNA3载体,用体外转录法制备地高辛标记的反义cRNA探针;(3)采用ISH技术,对9例正常前列腺、20例BPH及26例CaP标本的PSCA mRNA表达水平进行了检测。[结果] 正常前列腺、BPH及CaP组织PSCA mRNA表达阳性率分别为66.7%、70.0%及84.6%,强阳性率分别为0%、10%及57.7%。正常前列腺标本及绝大部分BPH标本PSCA mRNA表达局限于前列腺上皮的基底细胞层。部分BPH标本在基底细胞及外分泌细胞均有高表达。CaP标本PSCA mRNA主要表达于癌细胞,细胞间质和肌肉组织均无表达。统计学分析显示:正常前列腺与BPH组织PSCA mRNA表达水平无显著差异;CaP与正常前列腺、<WP=6>BPH组织PSCA mRNA表达水平均有显著差异;CaP临床Jewett-Whitmore-Prout分期、细胞Mostofi分级与PSCA mRNA表达水平均无相关性。[结论](1)PSCA是正常前列腺上皮细胞高度特异性表达的抗原,其表达具有局限于基底细胞层的特点;(2)BPH基本不影响PSCA的表达水平;(3)PSCA特征性的高表达于CaP细胞,且各型CaP之间具有表达一致性;(4)PSCA可能在CaP早期诊断与免疫靶向治疗方面有应用前景。
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