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桐粕主要是油桐籽经榨取桐油后所剩余的副产品,其蛋白质含量为36.29%—45%(浸出法生产),脱毒桐粕是一种较好的饲料资源。但桐粕毒素的成分仍不清楚,这就在一定程度上妨碍了桐粕在畜牧生产中的广泛应用。为了开发利用桐粕作为植物蛋白质饲料资源,同时寻找里面含有的活性物质,本文对桐粕进行了初步分离、提纯,得到一种白色针状晶体,首次通过了对晶体的鉴定,证明它为木脂素类化合物;并对不同提取成分生理活性作用进行了初步探讨。 采用NKA大孔吸附树脂法对桐粕粗提物进行富集分离,并对过NKA 30%乙醇收集部分进行聚酰胺柱层析分离纯化。桐粕过40目筛,超临界脱油,选用体积分数95%(V/V) 乙醇为溶剂,提取温度80℃,料液比1:10,进行回流提取。粗提物过NKA树脂后分为水洗、30%醇洗、50%醇洗、70%醇洗四个部分;30%醇洗部分过聚酰胺柱,收集的不同馏分进行HPTLC、HPLC检测,将相同组分合并,得到一种白色针状晶体,并通过UV、1H-NMR、13C-NMR、DEPT等光谱解析,证明晶体为(±)3,3′-bisdemethylpinoresinol,即(±)3,3′-双去甲基松脂醇。 采用MTT法检测了水提物等不同提取成分对正常鸡胚单层成纤维细胞(CEF)的毒性作用;同时将提取物与鸡新城疫病毒混合,37℃作用2h接种10日龄鸡胚测定其EID50,然后将混合物分别接种10日龄鸡胚和CEF,以了解提取物对鸡新城疫病毒的作用效果。实验结果表明:过NKA70%醇洗部分,对正常CEF的毒性作用最大,水提物毒性作用最小。而对新城疫病毒,水提物(浓度0.125mg/ml)的抗病毒效果最好;其次为过NKA 30%醇洗部分(0.2mg/ml),然后依次是水提物(0.5mg/ml)、水提物(0.25mg/ml)、无水乙醇析出物(0.2mg/ml)。