锌指蛋白KLF4在子宫内膜癌中的表达及意义

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目的:探讨锌指蛋白KLF4 mRNA在子宫内膜癌组织及正常子宫内膜组织中表达的变化,了解其在子宫内膜癌的早期诊断,病情监测中的意义,为子宫内膜癌的治疗和预后评估提供实验和理论依据。 方法:采用半定量的逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测37例子宫内膜癌组织(研究组)KLF4 mRNA的表达强度,以26例正常子宫内膜组织作为对照(对照组)。取子宫内膜癌组织标本37例,均经病理切片证实。按照1988年国际妇产科联盟(FIGO)的手术病理分期标准,Ⅰ期19例,Ⅱ期10例,Ⅲ期8例;病理分级G1级18例,G2级14例,G3级5例。另取26例正常子宫内膜组织作为对照,系因子宫肌瘤而手术并经病理切片证实为良性的子宫内膜组织,且半年内未服用过激素药物。所有的标本均于手术后置液氮中贮存。按Trizol(GIBCO/BRL)试剂盒说明书操作提取组织总RNA,按Superscript Preamplification System for First Strand cDNA Synthesis(Gibco/BRL)试剂盒说明书要求的标准条件合成cDNA第一链。PCR反应在25μl的反应体系中进行,用β-actin作为内参照以标化不同的反应,将其引物与KLF4的引物同时加入到PCR反应体系中。PCR扩增的反应条件为94℃预变性3min,继而94℃40s,58℃30s,72℃40s,28个循环,最后72℃延伸7min。PCR产物在含有溴化乙啶的琼脂糖凝胶中变性分离,电泳图像在成像仪Fluor-s MultiZmager(Bio-Rad)上扫描后,用Multi-Analyst软件包(Bio-Rad)确定KLF4和β-actin条带的密度比值,通过比较KLF4和β-actin条带的密度比值以确定组织中KLF4 mRNA的表达。 结果:1、每份实验标本中均检测到KLF4 mRNA表达,在子宫内膜癌中的相对表达强度为0.38±0.19,而在正常子宫内膜组织中的表达强度为0.72±0.16,与正常子宫内膜组织相比较,子宫内膜癌组织中KLF4 mRNA的表达丰度较低。统计学分析,有极显著性差异(P<0.01)。2、通过对KLF4 mRNA的表达与手术病理分期的相关性分析发现,子宫内膜癌患者KLF4 mRNA的表达强度依次为Ⅰ期子宫内膜中文摘要癌0.56士0.12,n期子宫内膜癌0.35士0.09,m期子宫内膜癌0.17士0.08,子宫内膜癌的手术病理分期愈晚,KLF4 mRNA的表达强度愈低,经统计学处理,差异有极显著性(P<0 .01)。3、随着病理分级增高,KLF4 mRNA的表达强度逐渐降低。表达强度依次为G1级子宫内膜癌0.54士0.11,兑级子宫内膜癌0.38士0.09,G3级子宫内膜癌0.巧士0.09,经统计学分析,差异有极显著性(P<0 .01)。4、正常子宫内膜组织中KLF4 mRNA的表达互相比较,相对表达强度的结果显示,增殖期子宫内膜为0.71士0.18,分泌期子宫内膜为0.74士0.19,经统计学分析,差异无显著性(P>0 .05)。 结论:在子宫内膜癌组织中,KLF4表达下调,并由此可促进细胞过度增殖,而且KLF4 mRNA的表达水平与子宫内膜癌的临床分期和病理分级呈负相关,提示KLF4可能参与了子宫内膜癌的发生和进展过程。
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