RCG的纯化与鉴定及体外诱导人胃癌细胞MGC80-3凋亡的研究

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目的以人胃癌MGC80-3细胞株为靶细胞,观察其在不同浓度的魟鱼软骨多糖(Ray Cartilage Glycosaminoglycans,RCG)作用后形态学的改变以及诱导凋亡及抑制增殖的作用,并进一步探讨其作用的时间、剂量—效应关系,为RCG用于胃癌的治疗提供初步的理论依据。方法本文共分两个部分,第一部分参考相关文献对RCG进行提纯,并利用聚丙烯酰胺凝胶电泳和高效凝胶渗透色谱法,对RCG进行鉴定。第二部分依据抗肿瘤药物临床前药效学评价的模式和方法,体外培养人胃癌MGC80-3细胞,采用CCK-8法观察不同浓度的RCG对其细胞增殖的抑制作用;采用流式细胞仪观察细胞的凋亡及生长周期的变化;采用吖啶橙染色细胞,荧光显微镜下观察细胞的形态学改变。结果RCG经纯化,基本实现了多糖的分离,聚丙烯酰胺凝胶电泳可用于RCG的鉴定。CCK-8法显示各浓度RCG均能抑制MGC80-3的增殖,且在一定剂量和时间范围内,其抑制率呈浓度、剂量依赖关系;流式细胞仪观察到各浓度RCG使细胞周期主要被阻滞于G1期;吖啶橙染色显示,凋亡细胞体积缩小、细胞核固缩、核碎裂、细胞解离成凋亡小体。结论聚丙烯酰胺凝胶电泳重现性较好,简单易行,可用于RCG的鉴定。RCG能有效的抑制人胃癌MGC80-3细胞的生长,诱导其凋亡。
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