全脑缺血再灌注大鼠海马Fas凋亡通路激活及HWTX-Ⅰ干预研究

来源 :湖南师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangming2106
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:通过观察HWTX-I 大鼠蛛网膜下腔用药对全脑缺血再灌注损伤在体动物模型海马CA1区锥体细胞及胞内线粒体形态结构变化、Fas凋亡通路相关因子核酸及蛋白表达的影响,探讨HWTX-I与由Fas分子启动的死亡信号转导通路之间的关系,确定其在以上模型中神经保护有效性和可能分子机制,为开发一种新型神经保护作用药物提供理论和实验依据。 研究方法:成年雄性SD大鼠48只,随机分为3组,即假手术组、非用药组和 HWTX-I1.0μg/kg剂量用药组,每组16只;每组8只用于光镜观察海马CAl区Nissl染色锥体细胞显微形态结构变化,电镜观察海马CAl区锥体细胞超微形态结构变化和免疫组化技术检测海马CA1区Fas凋亡通路相关因子蛋白表达变化;另8只用于PCR技术检测海马Fas凋亡通路相关因子mRNA转录水平变化;除假手术组大鼠外,非用药组和用药组大鼠都以“四血管闭塞法”构建全脑缺血再灌流损伤在体动物模型并结合蛛网膜下腔置管术。 研究结果: 1.光镜观察:在假手术组中,清晰可见数层锥体细胞排列整齐紧密;在非用药组中,锥体细胞排列散乱,分布稀疏,层次不完整;在用药组中,锥体细胞略呈疏散分布状态。 2.电镜观察:在假手术组中,锥体细胞线粒体嵴清晰可见,未见其出现断裂现象:在非用药组中,锥体细胞线粒体嵴模糊不清,出现线粒体嵴断裂和线粒体空泡化现象;在用药组中,锥体细胞线粒体嵴未出现明显断裂现象。 3.免疫组化定性实验:在假手术组中,几乎未见Fas、FasL(CD95L)、FADD、Caspase-3 及 Caspase-8蛋白表达;在非用药组中,阳性细胞数量多,较假手术组和用药组有更强 Fas、FasL、FADD、Caspase-3及 Caspase-8 蛋白表达;在用药组中,阳性细胞分布明显较非用药组少而稀疏。 4.免疫组化半定量实验:Fas、FasL、FADD、Caspase-3 及 Caspase-8阳性单位均值以非用药组为最高,其次是用药组,而假手术组最低;非用药组、用药组Fas蛋白表达与假手术组比较,差异具有非常显著性意义(P<0.01),用药组与非用药组比较差异具有显著性意义(P<0.05);非用药组FasL蛋白表达与假手术组比较,差异具有非常显著性意义(P<0.01),用药组与假手术组比较,差异具有显著性意义(P<0.05);非用药组、用药组FADD蛋白表达与假手术组比较,差异具有非常显著性意义(P<0.01),用药组与非用药组比较差异具有显著性意义(P<0.05);非用药组Caspase-3、Caspase-8 蛋白表达与假手术组比较,差异具有非常显著性意义(P<0.01),用药组与非用药组比较,差异具有显著性意义(P<0.05);HWTX-I 具有较明显降低全缺血再灌注大鼠海马CA1区锥体细胞Fas调亡通路相关因子蛋白表达水平作用。 5.RT-PCR技术检测:非用药组Fas、FasL、FADD及 Caspase-3 mRNA表达量与假手术组比较,差异都具有非常显著性意义(P<0.01);非用药组 Caspase-8 表达量与假手术组比较,差异具有显著性意义(P<0.05);用药组 Fas、FasL、Caspase-3 及 Caspase-8 mRNA 表达与非用药组比较差异都具有显著性意义(P<0.05);用药组 FADDmRNA 表达与非用药组比较,差异具有非常显著性意义(P<0.01);HWTX-I具有较明显降低全脑缺血再灌注大鼠海马细胞Fas调亡通路相关因子核酸表达水平作用。 结论: 1.HWTX-I蛛网膜下腔用药具有稳定全脑缺血再灌注损伤SD大鼠海马CA1区锥体细胞及其胞内线粒体形态结构的作用。 2.HWTX-I 蛛网膜下腔用药对全脑缺血再灌注损伤SD大鼠海马神经组织保护可能通过抑制Fas分子启动的死亡信号转导通路而发挥作用。 3.HWTX-I 对大鼠海马神经细胞在体外缺血缺氧培养时,钙离子通道和形态机能影响及神经保护量效关系、时效关系、分子机制有待进一步深入研究。
其他文献
本文通过对荣华二采区10
期刊
改革开放以来,随着社会主义市场经济的逐步建立和发展、政府职能的相应转变,在这种社会转型的大背景下,当今的竞技体育不仅体现一个国家科学技术和经济综合实力的竞争,同样也是人
山东圣人多,没想到肥城衡鱼村出圣人。 阳春三月,微风和煦,花红似火,绿柳含烟、桃花笑迎春。我和老伴迎着桔红色朝霞,史圣故里行。刚踏进大寺村,圆形史圣古 Shandong saint
新疆“358”项目实施五年来,矿产资源勘查取得重要进展,确定找矿远景区13处、矿集区23处,新发现矿产地75处,提交大型矿产勘查基地15处、大型勘查开发基地7处;新增重要矿产资
知识管理是对知识进行舰范和正式的管理,以利于知识的产生、获取、共享和创新。知识管理是知识社会中提升个人素质和竞争力,适应知识经济和学习型社会的重要武器。 当今社会
目前有关职业牛涯问题的探讨正日渐增多,但是对特定职业人群的牛涯发展的研究较少,而研究我国内地农村知识分子的牛涯发展的更难看到。笔者试图通过对江西省某中等师范学校毕业
本研究应用管理学、心理学和组织行为学的方法,以大连4所高校的学生会主席为研究对象,结合理论与实际,对高校学生会主席的胜任特征模型进行了研究。本研究依据前人成果,先后
从1935年到1949年,中国只有200多名研究生,就读于很少的几所学校中。1950年到1965年,全国共2万多名研究生,招生年代不确定,也没有一定的考场。1978年重新招收研究生以后,研究
目的:探讨STROOP启动和负启动两种启动范式对情绪STROOP范式有何影响以及情绪STROOP效应产生的机制。方法:让大学生被试在STROOP启动范式下和负起动范式下分别进行情绪STROOP
目的探讨氟致大鼠肾损伤的分子机制。方法将大鼠分为对照组和自由饮用氟化钠溶液低、中、高(15,30,60 mg/L)4组;9个月后处死大鼠,测定肾脏抗氧化水平和核因子κB(NF-κB)的表