转Bar基因稻谷喂养小鼠的食用安全性评价

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本文从分子生物学方向检测了Bar68-1稻谷中外源基因和外源蛋白在小鼠体内的残留情况,并对外源蛋白的消化稳定性及小鼠小肠mtDNA的突变性作了较系统的检测。(1)试验将60只18-24g区间的昆明小鼠分为转基因及对照两个小组,同时喂食配制好的转/常饲料90d,之后从中随机抽取小鼠,利用设计好的特异性引物对已经提取出的肝脏、肾脏、脾脏、小肠及腿肌的基因组DNA进行PCR扩增,检测结果显示在小鼠器官组织内没有发现外源基因片段,说明转Bar基因稻谷中的重组DNA没有在小鼠体内残留或转移。(2)采用酶联免疫吸附反应法检测Bar基因表达产物膦丝菌素乙酰转移酶(PAT)在小鼠的器官组织和消化道内的残留情况,试验结果未发现样品中存在PAT酶,消化道内(除胃外)不同部位的内容物也不存在Elisa显色反应,表明PAT酶能够在较短时间内被机体完全消化降解掉。(3)提取Bar基因及对照稻谷的蛋白后,参照农业部规定进行模拟体外消化稳定性试验,试验结果显示Bar68-1及D68稻谷的相关蛋白在模拟胃肠液环境中很快便消化降解掉,由此可见:转/常稻谷表达的蛋白产物不具备消化稳定性。(4)设计4对引物特异性扩增小鼠小肠mtDNA12S rDNA和16SrDNA序列区间,PCR产物送往上海生工进行正、反向测序,将测序结果与NCBI数据库比对后发现序列一致,未出现任何突变的情况,表明Bar没有对小鼠的小肠mtDNA12S rDNA和16S rDNA的保守区域造成突变影响。结论:在本试验条件下,未发现转Bar基因抗除草剂稻谷对小鼠消化系统的结构与功能造成明显影响。
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