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目的:了解我院临床分离铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶情况及亚胺培南-西司他丁钠对其的抗生素后效应,为临床抗感染治疗及医院感染的监测和控制提供循证医学依据。方法:2007年7月至2008年10月我院住院患者送检标本分离铜绿假单胞菌335株(同一患者同类标本分离菌株不重复计入)。采用VITEK 2 Compact自动微生物分析仪进行细菌鉴定和药敏测定,同时测定MIC。对于亚胺培南不敏感的铜绿假单胞菌,采用双纸片协同试验和PCR技术检测金属酶,并对PCR产物进行测序;对于亚胺培南敏感的铜绿假单胞菌,采用菌落计数法和流式细胞术检测亚胺培南-西司他丁钠对其的抗生素后效应。结果:1.铜绿假单胞菌的分离率为9.2%(335/3653),ICU患者铜绿假单胞菌分离率居全院之首,其感染部位主要分布于呼吸道(80.6%)。2.对亚胺培南不敏感的铜绿假单胞菌对氨曲南、头孢他啶、环丙沙星、左氧氟沙星、哌拉西林/他唑巴坦的耐药率均显著高于对亚胺培南敏感的铜绿假单胞菌(P<0.05)。3.我院对亚胺培南不敏感的铜绿假单胞菌产VIM-2型金属酶,阳性率为6.8%(3/44)。4.巯基化合物-IMP双纸片协同试验与PCR法检测MBL的阳性率差异无统计学意义(P>0.05);EDTA-IMP双纸片协同试验检测MBL的阳性率显著高于PCR法(P<0.05)。5. 2倍MIC时,亚胺培南-西司他丁钠对铜绿假单胞菌的PAE为0.14小时;4倍MIC时,亚胺培南-西司他丁钠对铜绿假单胞菌的PAE为1.21小时;8倍MIC时,亚胺培南-西司他丁钠对铜绿假单胞菌的PAE为2.42小时;10倍MIC时,亚胺培南-西司他丁钠对铜绿假单胞菌的PAE为2.66小时。6.流式细胞术检测PAE期间铜绿假单胞菌的PI%显著高于活菌,并且显著低于死菌。结论:1.铜绿假单胞菌是ICU患者医院感染的主要病原菌,显示多重耐药,应该动态监测细菌的耐药性,合理选择抗生素。2.产VIM-2型金属β-内酰胺酶是我院临床分离铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的重要机制。3.巯基化合物与抗生素双纸片协同试验是初筛金属β-内酰胺酶简单、快捷的方法,临床实验室日常筛选产金属β-内酰胺酶的铜绿假单胞菌可用此法。4.亚胺培南-西司他丁钠对铜绿假单胞菌的抗生素后效应随药物浓度增加而增加。5.流式细胞术是新的检测体外PAE方法,具有快速等优点,可在临床实验室推广。