桑杏护肺颗粒下调放射性肺纤维化Th2过度表达的研究

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目的:通过建立放射性肺纤维化大鼠模型,研究桑杏护肺颗粒对模型大鼠肺纤维化形成及进展过程中Th2相关细胞因子过度表达的影响,明确桑杏护肺颗粒干预放射性肺纤维化的作用机理。方法:192只8周龄,平均体重200±20g的SD雄性大鼠随机分为空白组、模型组,强的松组,桑杏护肺颗粒低剂量组,桑杏护肺颗粒中剂量组,桑杏护肺颗粒高剂量组,每组各32只。除空白组外,余各组采用直线加速器6MV-X线总剂量14Gy单次全胸照射建立放射性肺纤维化大鼠模型,照射后24h各组每天一次灌胃给药,空白组与模型组为0.9%生理盐水10ml,强的松组给予醋酸泼尼松片15.60ml/kg·d,桑杏护肺颗粒低、中、高各剂量组各5.60ml/kg·d、11.25ml/kg·d、22.50ml/kg·d,强的松及中药各剂量组给药时均用生理盐水稀释成等容积10ml溶液,连续给药24周。各组分别于第12、16、20、24周随机取8只大鼠处死,留取肺组织标本,以Masson染色法评价不同时间点各组大鼠肺组织纤维化程度,RT-PCR法测肺组织中Th2相关细胞因子IL-4、IL-5、IL-13的mRNA表达水平。结果:1.肺纤维化进程:空白组大鼠肺组织未见纤维化改变;各照射组肺组织病理学观察显示第12周时各照射组仍以不同程度的炎症表现为主,第16周后逐渐出现不同程度的纤维化,并随病程进展逐渐加重,至第24周实验结束时各照射组肺组织均以纤维化表现为主。2.各组肺组织Th2相关细胞因子IL-4、IL-5、IL-13的mRNA表达水平:空白组大鼠肺组织IL-4、IL-5、IL-13的mRNA表达水平较低且平稳;与空白组比较,各照射组不同时间点mRNA表达水平不同程度升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,强的松组及中药各剂量mRNA表达水平不同时间点呈不同降低,差异有统计学意义(P<0.05);与强的松组比较,第12至16周中药各剂量组mRNA表达水平较高,差异有统计学意义(P<0.05),第20至24周降低,差异无统计学意义(P>0.05);中药各剂量组各时间点比较,IL-4、IL-5、IL-13的mRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1.14Gy单次全胸照射成功复制放射性肺纤维化大鼠模型,各照射组第16周肺组织病理切片均出现不同程度纤维化表现;2.放射性肺纤维化进程中,桑杏护肺颗粒能够不同程度地下调肺组织中过度表达的Th2相关细胞因子IL-4、IL-5、IL-13的mRNA水平;3.药效比较结果显示:桑杏护肺颗粒在纤维化形成初期下调Th2表达水平的能力不及强的松,在纤维化逐渐加重的第20至24周则显示出与强的松相似的作用,这可能与激素强大而快速的抗炎及免疫抑制等作用有关。
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